HPLC方法开发典型思路经验小结

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HPLC方法开发典型思路经验小结

2023-04-26 15:49| 来源: 网络整理| 查看: 265

高效液相色谱方法的开发是一个繁复的过程,但不管再繁复,也有其规律可寻。方法开发过程中,一个总的原则是:先找到目标化合物的峰,然后调整峰形,再是进一步完善。找到目标化合物的峰要找到目标化合物的峰,我们该如何开展工作,先举一个例子,下面是分析氟康唑氯化钠注射液的一个谱图:谱图上的内容主要包括:色谱柱、波长、流动相、温度、流速和进样量这几项。这意味着如果这几个色谱条件都确定下来了就可以基本认为这个方法已经开发成功,所以开发方法时我们可以通过逐一的考查这几个色谱条件来进行。考查色谱条件是需要通过在色谱仪上进样来进行的,这就需要我们首先确立一个初始条件,即回答从何开始的问题。在回答好“从何开始”这个问题之前,我们先要了解我们的被分析物,就像一场战争,首先要知道自己的敌人是谁一样,我们要了解它的物理、化学性质,特别是化学结构式非常关键。所以,色谱方法开发工作可以通过如下的步骤来展开:1)收集资料对它的分子量、结构式,以及在水、甲醇、乙腈、四氢呋喃、正己烷和异丙醇中的溶解度有一个初步的了解。对分子量的了解在选择色谱柱的过程中是非常重要的,因为色谱柱填料的孔径对化合物的分离具有重要的影响。填料孔径对分离度和峰形是有一定影响,120A的色谱柱通常适用的范围为分子量



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