实验三 叶绿素含量的测定

一．实验原理：

根据朗伯―比尔定律，某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比 。

叶绿素在652nm(混合）、663nm、645nm有最大吸收峰。 根据在分光光度计下测定的吸光度，求得叶绿素的含量。

二。实验材料与实验器具：

植物材料： 女贞、海桐叶片

实验器具： 分光光度计；电子天平； 研钵； 试管； 小漏斗；滤纸； 吸水纸； 移液管 ；量筒； 剪刀

试 剂： 95％乙醇（或80％丙酮）；石英砂；碳酸钙粉

三。操作步骤

1.称取剪碎的新鲜样品0.1g 左右，放入研钵中，加少量石英砂和碳酸钙粉及3～5ml 95％乙醇，研成均浆，继续研磨至组织变白。静置3～5min。

2. 取滤纸1张，置漏斗中，用乙醇湿润，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，过滤到10ml试管中，用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次，最后连同残渣一起倒入漏斗中。

3.用滴管吸取乙醇，将滤纸上的叶绿体色素全部洗入漏斗中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容至10 ml ，摇匀。

4. 把叶绿体色素提取液倒入光径1cm的比色杯内。以95％乙醇为空白，在波长663nm、645nm下或652nm测定吸光度。

5. 计算公式：

叶绿素的含量（mg/g）= [(O.D652/34.5)×提取液体积×稀释倍数]/样品鲜重（或干重）。

Ca=13.95A663－6.88A645；

Cb=24.96A645－7.32A663

四．实验结果

女贞：叶绿素的含量（mg/g）=0.932/34.5*10/0.119=2.270 冬青: 叶绿素的含量（mg/g）=0.886/34.5*10/0.104=2.469

深圳大学实验报告课程名称学院生命科学报告人班级实验时间实验报告提交时间教务处制

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