紫外分光光度法测定新鲜蔬菜中VC含量 |
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维生素C 是一种对人体极为重要的营养物质,基于维生素C 溶液的最大吸收波长为246nm,因而建立了一种直接用紫外分光光度法测定新鲜蔬菜中维生素C 含量的方法。其线性范围为1.0~10.0μg /mL,回归方程为A = 0.0551C-0.0063,r = 0.9998,检出限为0.05μg /mL,样品回收率为99.9%~101.2%,相对标准偏差RSD10 时,随pH 增大,吸光度值逐渐减小则是由于在碱性环境中容易被氧化,因而不稳定、分解造成的。而pH 值在5~10范围内时,在最大吸收波长246 nm 处的吸光度值较大且无明显变化,综合考虑,实验不加盐酸、氢氧化钠溶液时较好,此时体系pH 值处在5~6.5范围内。 工作曲线、回归方程及检出限 图2. 维生素C 的标准曲线 在最佳实验条件下,加入不同量的维生素C,测其吸光度,绘制工作曲线( 图2 所示) 。结果表明,维生素C在1.0~10.0μg/ml 范围内吸光度A 与浓度C 之间符合朗伯—比尔定律,呈良好线性关系。其回归方程为A=0.0551C-0.0063,r=0.9998,检出限为0.05μg/ml。 干扰实验 对常见的共存组分进行了干扰实验,结果表明8mg/100g的维生素C存在下,相对误差控制在±5%以内时,允许的共存物的量为: 果糖8mg、葡萄糖8mg、柠檬酸4mg 及Na2 CO3、KCl、Mg SO4、NaHCO3各3mg。因此,本法具有较好的选择性,一般蔬菜中存在的物质对实验测定结果无明显影响。 样品分析 根据实验测定方法,测定了新鲜蔬菜: 西红柿、青椒、黄瓜、胡萝卜、土豆中的维生素C 含量,同时进行加标回收实验,结果如表1 所示。 表1. 蔬菜中维生素C 含量的测定结果 结论基于维生素C 在紫外光区有明显的吸收而建立的蔬菜中维生素C 含量的测定方法的线性范围为1.0~10.0ug/ml,回归方程A = 0.0551 C-0.0063,r = 0.9998,检出限为0.05μg / mL,回收率在99.9% ~101.2% 之间,相对标准偏差RSD |
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