1、首先，取酶标板，在空白孔中加入120μL蒸馏水，20μL试剂一，混匀。2、其次，进入20μL试剂二，混匀；加入40μL试剂三，混匀。静置5min后于540 nm测定吸光度，记为A空白。3、最后，酶标仪预热30 min以上，调节波长到540 nm，蒸馏水调零，即可完成酶标仪蒸馏水调零。