1、对照品溶液的制备：精密称取大黄素对照品（于五氧化二磷干燥器中干燥24小时）适量，加甲醇制成每1ml合0.08mg的溶液，摇匀，即得。

2、标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml，分别置10ml量瓶中，各加1％醋酸镁甲醇溶液5ml，加甲醇稀释至刻度，摇匀，随行空白。照分光光度法（中国药典2000年版一部附录ⅤB），在510nm的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

3、测定法：取本品10粒，倾取内容物，精密称定，研细，精密称取0.2g，置烧瓶中，加1.5mol/L盐酸20ml，沸水浴回流1小时，放冷，滤过，滤液置分液漏斗中，用适量水洗涤烧瓶和滤器，洗涤液并入分液漏斗中，用氯仿萃取3次，每次10ml，合并氯仿液；滤纸及残渣于50℃烘干，置索氏提取器中，加氯仿适量，回流提取至提取液无色，提取液与上述氯仿萃取液合并，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，滤于25ml量瓶中，用甲醇适量分次洗涤残渣和滤器，洗液并入量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。精密吸取2ml，置10ml量瓶中，加1％乙酸镁甲醇溶液5ml，加甲醇至刻度，摇匀，随行空白。照分光光度法（中国药典2000年版一部附录ⅤB）试验，在显色后60分钟内测定，在510nm波长处测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中总蒽醌的含量，计算，即得。

4、本品每粒含蒽醌以大黄素（C15H14O5）计，不得少于1.27mg。