药动学实验

药动学研究药物在生物体内的转运、代谢变化过程和药物浓度随时间变化的规律。其基本的过程是药物的吸收、分布、代谢、排泄。本实验包括三部分内容：

1．通过测定血、肝、脂肪组织中磺胺类药物浓度，以了解药物的吸收及分布；

2．通过测定正常及肾功能受损家兔血浆中PSP(酚磺酞)浓度分别求得PSP的血浆半衰期，以了解肾功能损害对药物消除的影响；

3．观察四氯化碳损伤小鼠肝功能对药物作用的影响以间接了解药物在体内经肝脏代谢的情况。通过实验初步了解药动学的研究方法。

一、药物在体内的分布

【目的】

观察小白鼠口服磺胺嘧啶（sodium sulfadiazine，SD-Na）后一定时间血液、肝脏、脂肪组织中药物的浓度，以了解药物在体内分布的情况。

【原理】

药物吸收后首先进入血液循环，以后继续通过各种屏障进入细胞间隙及细胞内液。药物在体内的分布多数是不均匀的，且处于动态平衡中，随药物的吸收与排泄不断变化。药理作用强度取决于药物在靶器官的浓度。了解药物在体内的分布有助于认识和掌握药物的作用和应用。

【预习要求】

1．预习药动学理论知识 见药理学教材相关章节。

2． 仪器 设备知识 Unico7200型数字式分光光度使用方法见第二章分析 仪器 及本实验附录2。

3．文献检索 检索相关研究论文。

4．预绘制实验原始数据记录表格和统计表格。

【材料】

体重25克以上雌性小鼠；80-2型离心机，组织匀浆器，7200型数字式分光光度仪或721分光光度计；酸式及碱式滴定管(供加 试剂 用)。150g/L磺胺嘧啶钠溶液，5%三氯醋酸溶液，5g/L麝香草酚溶液，5g/L亚硝酸钠溶液。

【方法】

1．测定血中SD浓度

（1）取小白鼠一只，用SD-Na溶液1.5g/kg(150g/L SD-Na, 0.1ml/10g) 灌胃，记录给药时间，于给药后45~60分钟剪断股动脉或取眼球放血，将血滴入含有肝素或枸橼酸钠的 离心管 中。

（2）取血0.2ml置另一试管内，加5%三氯醋酸溶液9.8ml，充分振荡后放置10分钟，过滤。

（3）取滤液6ml，加入5g/L亚硝酸钠溶液0.5ml，充分摇匀后再加入5g/L麝香草酚溶液(以200g/L 氢氧化钠溶液配制)1.0ml，摇匀，放置10分钟后，用7200型分光光度计测定(460nm波长)，记录所得光密度，从标准曲线查得磺胺嘧啶浓度，所得数即为血中SD-Na浓度。

2．测定肝、脂肪中磺胺嘧啶浓度

（1）小鼠放血后，打开腹腔取肝脏及脂肪组织(睾丸或卵巢附近处脂肪组织较多，此外两腹股沟处皮下亦有一定数量脂肪组织供取用)于培养皿中，肝脏和脂肪组织分别剪碎。

（2）秤取0.5克肝组织置于盛5%三氯醋酸溶液2.0ml之匀浆器中研碎，将匀浆倒入另一中试管，再加5%三氯醋酸2.0ml研磨一次，匀浆也倒入上述试管中，然后以5%三氯醋酸溶液洗涤匀浆器，溶液也倒入上述试管中，总容积达10ml为止，充分振摇，静置10分钟，过滤。

（3）取滤液6ml，加入5g/L亚硝酸钠溶液0.5ml,充分摇匀后再加入5g/L麝香草酚溶液1.0ml，摇匀后静置10分钟，用7200型分光光度计测定(460nm波长)，记录所得光密度，从标准曲线上查得磺胺嘧啶钠浓度，将此数值乘以2/5(因所取组织量为0.5g)即为肝中SD-Na浓度。

（4）依同法测定脂肪组织中SD-Na浓度。

3．标准曲线的制备：于一系列试管中，分别加入1g/L、0.8g/L 、0.6g/L、0.4g/L、0.2g/L 、0.1g/L、0.05 g/L的SD-Na溶液0.2ml，再分别加入5%三氯醋酸溶液9.8ml，摇匀，取6ml 再依次加入5g/L 亚硝酸钠溶液0.5ml，5g/L麝香草酚液1ml，摇匀后静置10分钟，以7200或721型分光光度计(460nm波长)，记录各管的光密度。以光密度为纵座标，SD-Na浓度(mg/100ml)为横座标，在座标纸上绘一标准曲线。

【观察项目】

测定血、肝和组织中的SD-Na浓度并将数据填入表7-3中。

表7-3.小鼠口服SD-Na后不同组织的含量比较

组织 SD浓度(mg/100ml) 血 肝 脂肪

【实验报告要求】

1．题目。

2．署名 作者和合作者姓名及单位

3．结构式摘要（目的，方法，结果，结论）。

4．材料和方法 主要实验材料，实验数据记录条件，观察指标，数据用`x±s表示，统计方法。

5．结果 合并全班数据，按表7-3要求填表，比较小鼠口服SD-Na后不同组织的含量。

6．讨论 根据实验结果，分析讨论药物SD-Na在体内分布的不均匀性，靶器官的浓度不均匀性对药理作用强度影响。

7．参考文献。