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科研实验中我们经常需要配制各种浓度的试剂。例如细胞实验一般需要加入小分子激动剂/抑制剂;分子转化实验一般会加入抗生素;免疫实验需要加入免疫刺激物/免疫佐剂等等。这些昂贵的试剂浓度一旦计算错误,不仅挑灯夜战得来的数据毁于一旦,早日发文的愿望也随之破灭,可谓一失足成千古恨。今天小爱就为大家解决这一难题,让我们学会快速换算试剂浓度,摆脱科研失误。
案例一 抑制剂储存液配制 我们买来的小分子抑制剂一般是冻干粉,需要把它配制成溶液。首先,我们应该知道药物的分子量、溶解度以及规格。如果是毫克级小包装,一般不需要称量分装,直接在原瓶中溶解配成储存液。 以ROCK抑制剂Y-27632为例,产品信息如下: CAS号 规格 分子量 可溶性/溶解性 146986-50-7 5mg 247.34 DMSO: ≥ 32 mg/mL (129.38 mM)该药物推荐溶剂DMSO,同时,最大只能配成129.38 mM的储存液。这一点非常重要。有些人没有注意药物溶解性,直接在非水溶性药物中加入PBS配置,结果药物不溶,“损失惨重”。 假如我们需要配置10mM储存液,计算公式如下:
即向含5mg Y-27632的原瓶中加入2.02 mL DMSO,即可配制成10mM溶液。(注:此处要预估原瓶的容量,如果原瓶容量小于2 mL,应考虑配置更大浓度的储存液,如20mM,加入1.01 mL DMSO)。 此外,我们也会经常遇到质量浓度和摩尔浓度单位转换,同样以10mM Y-27632为例:
案例二 抑制剂储存液稀释 我们买来抑制剂的冻干粉,配制储存液的浓度为10mM,如果需要使用终浓度为25uM进行细胞实验,需要加入多少抑制剂储存液呢?记住下面这个稀释公式就可以了:
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首先,注意单位,我们假设最终体积为2mL,代入公式: 即我们需要吸取5uL的储存液进行实验操作。
案例三 百分比浓度换算 我们在使用二硫苏糖醇(DTT)做实验时,会遇到这样的问题:已发表的文献中使用0.1%的DTT溶液,而你购买的DTT为1mol/L的储存液,那么这该如何换算呢?请听小爱为您解答: DTT的分子量为154,即154 g/mol,储存液换算成质量浓度C1为 假设需配制1L的0.1% DTT溶液,即V21L1000mL 0.1% DTT溶液为0.1g/100mL1g/1000mL1g/L,即C21g/L 再使用公式(2) C1×V1=C2×V2 可得: 154(g/L)×V1(L)=1(g/L)×1(L)V1=6.5mL,即吸取6.5mL 1mol/L的DTT储存液,加入993.5 mL稀释液中即可获得0.1% 的DTT溶液。 如果我们购买的是固体二硫苏糖醇,配制0.1%的DTT溶液方法如下:精确称取1g二硫苏糖醇,用水定容至1000mL即可。
DL-二硫苏糖醇科普 DL-二硫苏糖醇(DL-Dithiothreitol,DTT) 具有很强的还原性,其还原性很大程度上是由于其氧化状态六元环(含二硫键)的构象稳定性。DTT有抗氧化作用,它能保护酶分子上的还原性基团,维持还原性环境,稳定酶的活性。DTT中还含有一定RNA酶抑制剂,具有抑制RNA酶活性的作用。具有巯基乙醇相似的作用,但DTT的刺激性气味要小很多,毒性也比巯基乙醇低很多。用作蛋白质巯基保护剂和蛋白质二硫键的裂解和顺序分析。 DL-二硫苏糖醇应用: 1、作为牛奶中主要过敏原αs1-酪蛋白的还原和烷基化反应物之一。 2、作为精子去膜和再激活培养基的一个组分。 3、因硫醇可有效保护生物催化剂的活性位点而维持酶的稳定性。 4、作为还原剂用于测试N-乙基马来酰亚胺与巯基反应的特异性。
产品信息: 货号 产品名称 规格 货期 abs9226 DTT溶液(1mol/L) 5mL 现货 abs47002083 DL-二硫苏糖醇(>98%,BR级) 5g/25g 现货 abs42017588 DL-二硫苏糖醇(>97%) 1g/5g 现货
小分子抑制剂产品推荐: 货号 产品名称 规格 货期 abs810012 Brefeldin A 10mg/25mg 现货 abs812852 PMSF 50mg/100mg/200mg 现货 abs810003 U0126 5mg/10mg/25mg/50mg/100mg 现货 abs810466 Cisplatin 5mg/50mg 现货 abs810001 LY 294002 10mg/25mg/100mg 现货 abs812864 Y-27632 5mg/10mg/50mg 现货 abs812972 Poly(I:C) 10mg/50mg 1-2周 abs810008 SP600125 10mg/50mg 现货 abs810744 Erastin 5mg/10mg/50mg/100mg 现货 abs817419 Suramin Sodium Salt 25mg 现货 abs817348 IBMX 25mg/100mg 现货 abs810006 Staurosporine 5mg/25mg 现货 abs812846 Geneticin (G418 Sulfate) 250mg/500mg 现货 abs810030 Rapamycin 5mg/10mg/100mg/1g 现货 abs810575 3-Methyladenine 25mg/50mg/200mg/500mg 现货 abs819421 Prostaglandin E2 5mg/50mg 现货 abs817025 Capsaicin 25mg/50mg/100mg 现货 abs810009 SB202190 (FHPI) 5mg/50mg 现货 abs810016 Cyclosporin A 5mg/25mg/50mg 现货 abs810010 PD 98059 5mg/10mg/50mg 现货 abs819747 Nigericin sodium salt 5mg/10mg/25mg 现货 abs812975 Monensin sodium salt 25mg/100mg 现货 abs810716 Doxorubicin hydrochloride 5mg/50mg 现货 abs810020 Paclitaxel 5mg/10mg/25mg/50mg/100mg 现货 abs810481 SB-431542 5mg/10mg/50mg 现货 abs810640 Y-27632 2HCl 5mg/50mg 现货 abs812033 Leupeptin Hemisulfate 5mg/10mg/25mg 现货 abs817902 Pepstatin A 10mg/25mg/50mg/100mg 现货 abs811913 GsMTx4 1mg/5mg 现货 abs814916 Gastrin I (human) 1mg/5mg 现货 abs817694 A-83-01 5mg/10mg/25mg/50mg 现货 abs810052 CHIR-99021 (CT99021) 5mg/25mg 现货 abs810473 DAPT 5mg/10mg/50mg 现货 abs810530 Dorsomorphin free base 5mg/50mg 现货 abs810050 Forskolin 5mg/25mg/100mg 现货 abs816969 Nicotinamide 50mg/100mg/200mg/500mg 现货 abs810009 SB202190 (FHPI) 5mg/50mg 现货温馨提示:Absin所有产品仅用于科学研究,请勿药物、家用或其他用途。 上海优宁维生物科技股份有限公司 试剂 | 耗材 | 仪器 | 软件 | 定制 | 实验服务 | 供应链 免费热线:4008-168-068 咨询邮箱:[email protected] 订购商城:www.univ-bio.com 微信公众平台:优宁维抗体专家,欢迎关注! 小优博士(小程序):5大课堂, 让你的科研不再难! ![]() ![]() |
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