双重染色法免疫荧光组织化学染色步骤

双重染色法免疫荧光组织化学染色步骤 若在同一标本中有A和B两种抗原需要同时显示，A抗原的抗体用FITC标记，B抗原的抗体用TRITC标记，可采用以下染色方法：免疫荧光细胞化学双重染鱼法原代培养胚胎14天大鼠端脑细胞：在骨发生形态蛋白―{诱导下，乙酰胆碱转移酶(呈绿色荧光)和同源域蛋白Islet―1(呈红色荧光)共存于细胞质内(激光扫描共聚焦显微镜观察) 1．一步双染色法先将两种荧 ...

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HRP显色

显色（HRP酶）1．增强化学发光法(ECL)Ecl 显色原理：氨基苯二酰肼类主要是鲁米诺及异鲁米诺衍生物，是最常用的一类化学发光剂。鲁米诺（luminol，5＇-氨基-2，3-二氢-1，4-酞嗪二酮）的分子结构及化学反应式如下：鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物，也可用作过氧化物酶的底物。在Ecl底物中，含有H2O2和鲁米诺，在HRP（辣根过氧化物酶）的作用下，发出荧光来。试验步骤：1） ...

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直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

免疫荧光细胞化学技术，它的原理是根据抗原抗体反应的规律，把已知的抗原或抗体标记上荧光素，制成荧光抗原或抗体，然后以它作为探针来检测组织或细胞内的相应物质。应用的方法有直接法、间接法、夹心法和补体法等。在荧光显微镜下，根据其形成复合物所发的荧光，来确定判断检测物的来源、性质和部位。1、直接法：这是最早的方法。其基本原理是用已知的抗体标记上荧光素后成为特异性荧光抗体，染色时将该抗体直接滴在载玻片上进 ...

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DNA变性与复性

DNA变性与复性 一、变性 DNA的三维空间构象即超螺旋结构主要靠一些非共价键如氢键折叠形成，这些非共价键都是键能较低的键，很容易在外来作用的影响下断裂，使双螺旋解开，导致空间结构破坏，使规则的DNA变成不规则的线团，因而发生性质改变，称为DNA变性(denaturation)。变性的DNA为单链。加热接近100℃、改变pH(10或 如果通过加热使DNA变性，根据DNA变性的程 ...

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