读一文掌握LncRNA研究套路 |
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近年来lncRNA的研究进展迅猛,各类 lncRNA 被大量发现,lncRNA的研究将是 RNA 基因组研究领域非常热门的一个方向。小编也正好也在做lncRNA相关的课题,今天就总结一下lncRNA的研究套路和最新研究进展。 • LncRNA基本介绍 LncRNA:long non-coding RNAs是一类长度大于200nt,但不编码蛋白质的RNAs,广泛存在于动植物中。它们曾长期被误认为是遗传暗物质,但近些年研究证实这类RNAs在生物的生命活动过程中起着重要的调控作用。
特点 1. 长度在200-100,000nt 2. 没有编码蛋白质潜能 3. 具有细胞或组织类型特异性 4. 表达量和保守性比mRNA低 5. 部分lncRNA不含有polyA尾巴 6. 部分也会翻译小肽段
• LncRNA功能及作用形式
功能 1. 结合转录因子,干扰其靶基因,从而调控转录 2. 作为分子海绵,吸附miRNA 3. 与调节蛋白结合,影响蛋白多聚物的形成 4. 招募染色质修饰因子,改变染色质的修饰水平 5. 与mRNA配对结合,影响翻译,剪切,mRNA的稳定性(类似miRNA功能) 作用 1. Co-location,也称cis作用 2. Co-expression, 也称trans作用 • LncRNA研究基本技术
1. 芯片或测序寻找新的lncRNA 2. 生物信息学分析 3. lncRNA定位 4. 过表达或敲减功能验证 5. lncRNA互作机制研究 • LncRNA的生物信息学分析 1. 基本处理 Ø rRNA比例评估 Ø 基本比对统计,链特异数据评估 Ø Cufflink,stringtie转录本组装 2. 特性分析 Ø 序列,位点保守性分析 Ø 外显子个数,表达和长度分析 Ø 定量差异分析 3. 新LncRNA鉴定 Ø 与已知lncRNA库比对过滤 Ø 过滤exon |
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