流细胞术利用细胞的大小和粒度来定义细胞群的特征。前向散射光FSC的细胞大小（Forward Scatter）测量细胞的粒度采用侧向散射光SSC(Side Scatter)测量。FSC收集细胞折射后向前散射的光，因此FSC不仅测量细胞大小，还与核质比、膜形状等细胞特征有关；SSC收集垂直于激光束的散射光和细胞内颗粒的散射光，因此SSC可以反映细胞的复杂性和粒度，如下图所示。

1.细胞亚群的分类

FSC和SSC通常以0到25000的线性模式运行。位于FSC/SSC图右上部(如粒细胞)的大细胞具有较高的FSC和SSC值。红细胞等小细胞具有较低的FSC值，因为红细胞在实验中已经溶解，其碎片出现在散点图的左下角；淋巴细胞是小细胞，颗粒小，所以FSC和SSC值较低。单核细胞较大，颗粒较大，细胞群在FSC轴上进一步向右移动，在SSC轴上稍微向上移动，因此其FSC和SSC值较高。顾名思义，粒细胞是颗粒状的，而且很大，所以它们有很高的FSC和SSC值。

2.确定细胞活性状态

FSC/SSC不仅可以对细胞群进行分类，还可以帮助消除细胞碎片和死细胞， 判断细胞活性状态。FSC和SSC通常低于死细胞和细胞碎片，而死细胞的FSC会变小，SSC会变大。如下图所示，根据FSC和SSC的判断，A图细胞活性差，基本上是死亡细胞和凋亡细胞(P1门89.6%)；B图中的细胞群分为两组，P1门中的细胞群为凋亡和死亡细胞(27%)，P2门中的细胞活性良好。FSC/SSC常用于确定细胞活性状态、分选后细胞活性状态和原代细胞提取的活性状态。

FSC/SSC能真正反映细胞的生死状态吗？我们用7AD分析B图中的细胞。从下图可以看出，P门中有95.2%的7AAD细胞，而P1门中有52.5%的7AAD细胞。虽然P1门中有52.5%的7AAD-细胞，但从图中可以发现其大部分细胞集中在左下角。这与7AAD的染色原理有很大关系。7AAD 它是一种经典的核酸染料，通常通过插入DNA来判断细胞的活性。7AAD不能穿透完整的细胞膜，但膜裂缝和孔隙可以通过细胞凋亡形成。7AAD可以使任何缺乏完整膜的细胞被核染色。然而，在细胞凋亡的后期，如细胞凋亡的后期，只有含有核酸的凋亡体才能被7AAD染成阳性，其他细胞碎片不含或含有低DNA含量，这部分群体将成为7AAD-群体事件。因此，FSC/SSC可用于判断活死细胞。

3.消除细胞双链体

信号处理器通过信号处理器脉冲FSC和SSC信号脉冲（Height）、面积（Area）和宽度（Width）定量为一定值。计算机工作站对这些数据的配置进行了进一步的分析和处理。因此，双链体细胞可以通过面积信号、宽度信号和高度信号进行处理。一般使用FSC-H/FSC-A、FSC-H/FSC-W和SSC-H/SSC-W处理双链体细胞。

小结

FSC和SSC是流式细胞术的基本术语。科研人员充分利用FSC/SSC，它可以很容易地判断和检测前细胞活性状态、细胞分选后细胞活性状态、免疫细胞分群等。同时，FSC/SSC可以用来去除细胞中的粘连体细胞。