如果医生怀疑暴露于HIV感染，则进行HIV筛查检测。此外，医生建议所有成人和青少年，特别是怀孕女性，不论其感染风险如何都做一次 HIV 筛查检测。任何人若担心感染了艾滋病毒，可以要求进行测试。此类测试是保密的，通常免费进行。

目前（第4代）的联合筛查试验检测两种提示HIV感染的物质：

HIV抗体

HIV抗原（p24抗原）

抗体是由免疫系统产生的蛋白质，有助于身体抵御特定的攻击，比如 HIV的攻击。抗原是可以引发免疫应答的外源性物质。

人体需要数周时间才能产生足够抗体以被检测到，因此在病毒进入人体后的最初几周（称为急性 HIV 感染的“窗口期”），抗体检测结果为阴性。但是，p24 抗原检测结果可能在初次感染后 2 周内呈阳性。联合检查可由实验室快速完成。此外，这些检测的版本可在医生的办公室或诊所进行（称为床旁检测）。如果结果为阳性，医生会进行一项检测，以区分 HIV-1 与 HIV-2，并进行另一项检测以检查血液中的 HIV RNA 含量（病毒载量）。

联合筛查检测比旧的筛查检测更快且更简单，其使用酶联免疫吸附试验 (ELISA) 检测 HIV 抗体，然后使用单独的、更精确的特异性检测（例如免疫印迹试验）确认阳性结果。

也可使用其他的、旧的快速床旁检测。这些检测可以使用血液或唾液样本完成。如果这些快速筛查检测的结果为阳性，则通过 ELISA（有或无蛋白质印迹）或通过重复一次或多次其它快速检测来证实。

如果风险不高的人化验结果为阴性，则无需再复查，除非风险状态发生改变。如果风险最高的人的测试结果为阴性（尤其是性活跃、有多个性伴侣或不进行较安全性行为者），则应每 6 到 12 个月重测一次。

HIV RNA 检测可以确认抗体检测结果阳性，或者当抗体检测结果为阴性时，检测到 HIV感染的证据。HIV RNA 检测通常使用技术生成许多微生物的遗传物质拷贝（称为核酸扩增）。这些检测可以检测到血液中极少量的HIV RNA，并且非常准确。