栎类外生菌根形态学特征描述 |
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摘要:外生菌根的形成,可增加植物根系与土壤的接触面积,扩大植物根系的吸收范围,改善植物的营养条件,促进植物生长,提高植物抗逆性与抗病性。但目前,我国南方栎类树种外生菌根资源调查及形态学描述还鲜有报道。所以本研究主要是对栎类树种的外生菌根进行处理并在显微镜下观察进行形态学特征描述,这对进一步认识栎树外生菌根、统筹外生菌根资源具有重要的科学意义和应用价值。在对栎类外生菌根的分枝结构、菌套特征和横截面进行形态学描述时,发现所有栎树均可形成外生菌根结构且都可采用形态学特征描述的方法。本研究结果对深入认识栎类外生菌根真菌多样性、挖掘优良菌株,从而提升栎类的栽培质量具有重要的参考价值。 关键词: 栎类, 外生菌根, 菌根形态学描述 材料与试剂 菌根样品甲苯胺蓝 (国药集团化学试剂有限公司,沪试,catalog number: 71041280)二甲苯 (国药集团化学试剂有限公司,沪试,catalog number: 10023418)冰乙酸 (国药集团化学试剂有限公司,沪试,catalog number: 10000218)甲醛 (国药集团化学试剂有限公司,沪试,catalog number: 10010018)乙醇 (国药集团化学试剂有限公司,沪试,catalog number:80176961)石蜡 (国药集团化学试剂有限公司,沪试,catalog number:69018961)中性树胶 (国药集团化学试剂有限公司,沪试,catalog number: 10004160)番红 (阿拉丁生化科技股份有限公司,Aladdin,catalog number: S104171-50g)固绿 (索莱宝科技有限公司,Solarbio,catalog number: IF0020)无菌水FAA固定液 (见溶液配方)染色剂 (见溶液配方)仪器设备 自封袋镊子长绣花针 (针长度13.5 cm,针尖直径1 mm,针柄直径3 mm)载玻片超景深显微镜 (基恩士有限公司,Keyence,model: VHX-5000)体式显微镜 (北京清大德人科技有限公司,清德,model: XTL-81)光学显微镜 (德国卡尔蔡司公司,Carl Zeiss,model: Axio Scope A1)AxioCamMRc5数码摄像机 (德国卡尔蔡司公司,Carl Zeiss,model: AxioCamMRc5)切片机 (赛默飞世尔科技有限公司,Thermo Scientific,model: Microm HM325)电热鼓风干燥箱 (上海新诺仪器设备有限公司,新诺,model: DHG-9000A)实验步骤 样品采集及处理1.1苗圃地一年生实生幼苗苗圃中幼苗根部常覆盖密集的菌丝,这被认为是潜在的外生菌根。将1年生幼 苗 (每个栎属物种至少有3到5株幼苗) 根系发育良好的外生菌根放入无菌聚 乙烯袋中并带回处理。1.2野外栎树母树林在距树干0.5-1 m处,去除凋落物层,小心挖取带土的菌根样品放入自封袋里(无需灭菌),采集完毕后立即将样品带回处理。1.3处理将采集到的栎类外生菌根在无菌水中清洗、震荡 (清洗可在盛有无菌水的容器 中进行,适当用手进行揉搓)。洗净后 (菌根表面无泥土和其他杂质) 将样品用于形态观察和特征描述。外生菌根的分支结构及外层菌套观察选取典型菌根在超景深显微镜下根据Agerer (2012) 所提出的外生菌根形态分类要点,观察其分支类型、分支末端形状、颜色、表面性状、外延菌丝和根状菌索等特征,并进行拍照。 不同类型外生菌根的分枝结构如下图 (图1) 所示。 对苗圃地栎树幼苗外生菌根的调查发现,所有物种均可形成相对发达的外生菌根,白色菌套明显可见,表面光滑呈网状至羊毛状,大多呈单轴羽状分枝、塔状分枝、二叉分枝、单轴不分枝等。![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() 注意事项 脱水必须在含有盖子的瓶中进行,以防高浓度乙醇吸收空气中水分导致浓度降低而使脱水不彻底。若脱水彻底,组织则显现透明状态,若组织中有白色云雾状,说明脱水不彻底。使用二甲苯进行透明时,应避免其挥发和吸收空气中的水分,并保持其无水状态。溶液配方 FAA固定液的配制70%或者50%浓度乙醇:冰乙酸:甲醛=18:1:1染色剂的配制1%番红:1 g番红加入50%乙醇100 ml0.1%固绿:1 g固绿加入95%乙醇100 ml致谢 感谢中国林业科学研究院中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资 (CAFYBB201 7MA003) 和国家自然科学基金项目 (31722014) 对本研究课题的大力支持。 参考文献 靳微,杨预展,孙海菁,陈连庆,袁志林. (2020). 弗吉尼亚栎母树林外生菌根的真菌多样性. 林业科学56: 120-132.Agerer, R. (2012). Colour atlas of ectomycorrhizae. Volume 15. Einhorn-Verlag, Schwäbisch Gmünd. ISBN: 9783921703779. Please login or register for free to view full text View full text Download PDF Q&A Copyright: © 2021 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC. 引用格式:王科选, 靳微, 杨预展, 袁志林. (2021). 栎类外生菌根形态学特征描述. // 微生物组实验手册. Bio-101: e2003657. DOI: 10.21769/BioProtoc.2003657.![]() ![]() |
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