培养基抑菌剂有哪些?史上最全介绍!

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培养基抑菌剂有哪些?史上最全介绍!

2023-09-23 01:03| 来源: 网络整理| 查看: 265

在选择性增菌、分离和计数培养基中常需要添加不同的抑菌剂,来抑制非目标菌的生长,提高目标菌检出率。此类培养基质量的优劣,通常在于抑菌剂的选择和质量。抑菌剂原则上应尽可能抑制非目标菌生长,而不影响目标菌生长。新型抑菌剂的研发和生产,将直接大幅度提高培养基质量,能更加准确和方便地检测出致病微生物。

常用的抑菌剂可分为:胆汁提取物、化学抑菌剂、染料抑菌剂和抗生素等。      ①胆汁提取物:胆盐、胆酸、牛磺胆酸。      ②化学抑菌剂:亚硒酸钠、亚碲酸钾、十二烷基硫酸钠、苯乙醇、溴化十六烷基三甲铵、四硫磺酸钠、亚硒酸氢钠、亚硫酸铋、叠氮化钠、亚硫酸钠、丙酸钠、醋酸铊、碘液、玫瑰红酸、高浓度氯化钠等。      ③染料抑菌剂:煌绿、孔雀石绿、结晶紫。      ④抗生素类:青霉素G、硫酸庆大霉素、两性霉菌B、多黏菌素B、多粘菌素E、链霉素、氯霉素、放线菌酮、头孢霉菌、杆菌肽、万古霉素、新生霉素、甲氧苄胺嘧啶(TMP)、磺胺吡啶、制霉菌素、土霉素等。

1. 胆盐

常用胆盐有牛胆盐、猪胆盐、三号胆盐、去氧胆酸钠。胆盐是一种胆酸的钠盐,是微生物培养基中最常用的选择性抑菌剂;从动物胆汁中提取而来;是胆酸的羧基和甘氨酸或牛磺酸的氨基,通过酰胺键结合而成。脱氧胆酸钠是在3号碳和12号碳上带有羟基的二羟基化合物,缺少羟基的胆酸没有活性。脱氧胆酸钠在水溶液中呈弱碱性,为无色。胆盐主要抑制革兰氏阳性细菌生长。其原理为降低培养基与菌膜界面上的表面张力,并使细胞膜紊乱,从而加速细胞自溶。胆盐在pH值6.5以下会有胆酸析出物,在菌落周围形成沉淀环,使菌落色素不易向外扩散,更有利于菌落的鉴别。

微生物培养基中应用最多的为牛胆盐,其质量直接影响对革兰氏阳性菌的抑制性。 由于生产工艺的不同,牛胆汁中有些油脂类物质没有除净,配制培养基后会使液体培养基浑浊,而在含琼脂培养基表面出现油状物,影响培养基理化指标。

胆盐在1000mL培养基中用量:猪胆盐5g〜10g、牛胆盐5g、去氧胆酸钠1. 5g〜2.5g、 三号胆盐1g~l.5g。

2. 十二烷基硫酸钠(SDS)

白色或淡黄色粉状,易溶于热水,溶于水,溶于热乙醇,微溶于醇,不溶于三氯甲烷、 醚;对碱和硬水不敏感;分子式:C₁₂H₂₅SO₄Na,相对分子质量:288. 38,pH值:7.5〜9.5; 是一种无毒的阴离子表面活性剂;其生物降解度>90%;主要是抑制革兰氏阳性细菌生长和发育。不同厂家和不同批号都存在差异,使用前应进行测试。在培养基中的用量为: 1000mL培养基中加入0. 1g〜0. 2g。

3. 亚硒酸氢钠

白色结晶,极易吸潮。易溶于水,不溶于醇。分子式:HNaO₃Se,相对分子质量 150.955。 属剧毒品;对胎儿具有致畸性,使用时应特别小心;主要用于沙门氏菌选择性增菌培养基,例如,亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)等,对大肠埃希氏菌等大肠菌群和革兰氏阳性菌具有强抑制性。对伤寒沙门氏菌和其他沙门氏菌仅轻微抑制。配制成培养基时,不可加热温度过高,不应超过50°C。否则,配制成的即用型培养基,极易析出红色沉淀物,而使亚硒酸氢钠失去或降低抑制性。

4. 亚啼酸钾

白色易潮解的固体,易溶于水,加热分解。有毒,使用时应小心;可抑制绝大部分的革兰氏阴性细菌,而大肠埃希氏菌O157菌、变形杆菌、霍乱弧菌对其耐受性强。在革兰氏阳性细菌中,葡萄球菌和白喉杆菌对其耐受性强,其他革兰氏阳性细菌受到不同程度的抑制。因此,亚啼酸钾溶液常作为一种抑菌添加剂加入冷至50°C左右的培养基中。

5. 煌绿

本品为一种染料,又称为翡翠绿、亮绿、孔雀绿G,金黄色闪光结晶,可溶于水和乙醇, 为三苯甲烷染料;能抑制革兰氏阳性菌;高浓度时,也可抑制大肠埃希氏菌等大肠菌群,而沙门氏菌对其耐受性强。在培养基中,常用于沙门氏菌选择分离培养基。由于不同厂家 和不同批号的煌绿,其色素含量有差异,使用前需用标准菌株进行测试实际使用量,以免抑制性过强或过弱。

6. 孔雀石绿

孔雀石绿是一种带有金属光泽的绿色结晶体,又名碱性绿、严基块绿、孔雀绿,既是杀真菌剂,又是染料,易溶于水,溶液呈蓝绿色;溶于甲醇、乙醇和戊醇;能抑制革兰氏阳性菌;高浓度时,也可抑制大肠埃希氏菌等大肠菌群,而沙门氏菌对其耐受性强。在培养基中,经常用于沙门氏菌选择增菌培养基。

7. 四硫磺酸钠

由硫代硫酸钠和碘经氧化生成的四硫磺酸钠,有抑制大肠埃希氏菌作用,而对沙门氏菌无抑制作用。因沙门氏菌有四硫磺酸酶,能分解四硫磺酸钠,而大肠埃希氏菌没有这种酶,所以生长被抑制。四硫磺酸钠对热非常敏感,极易分解为硫酸、亚硫酸和硫。故培养基加碘液后不能再加热。

8. 亚硫酸铋

由柠檬酸铋铵和亚硫酸钠在水溶液中反应生成亚硫酸铋;可抑制革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中的大肠菌群,而对沙门氏菌基本没有抑制性。沙门氏菌还原铋离子可使菌落着上金属光泽。柠檬酸铋铵的质量好坏影响亚硫酸铋的质量,在使用前应先检测柠檬酸铋铵和亚硫酸钠的质量。

9. 亚硫酸钠

化学式Na₂SO₃,白色,单斜晶体或粉末;对眼睛、皮肤、黏膜有刺激作用,可污染水源;受高热分解产生有毒的硫化物烟气;具强还原性,可阻断微生物的正常生理氧化过程,抑制微生物繁殖。添加于培养基中主要是抑制革兰氏阳性菌生长发育和繁殖。

10. 苯乙醇

β-苯乙醇,分子式为C₈H₁₁O,相对分子质量为122. 17;无色黏稠液体,溶于水、甘油, 可混溶于醇、醚;主要抑制革兰氏阴性菌。在微生物培养基中添加量约为0.25%。

11. 叠氮化钠

化学式NaN₃,相对分子质量65.01,白色六方系晶体,无味,无臭,纯品无吸湿性,剧毒;相对密度1.846;不溶于乙醚,微溶于乙醇(25°C时 0.3),溶于水;虽然无可燃性,但有爆炸性。主要抑制革兰氏阴性细菌的生长发育,对变形杆菌抑制效果非常显著。在肠球菌选择性分离培养基中的用量一般为0.05%左右;而金黄色葡萄球菌选择性分离培养基中的用量一般约为0.02%。实际应用和生产中应进行测试后,选定最佳的用量。

12. 结晶紫

别名龙胆紫,属于三苯甲烷类染料消毒剂,和微生物酶系统发生氢离子的竞争性对抗,使酶成为无活性的氧化状态,从而发挥杀菌作用。主要对革兰氏阳性菌如葡萄球菌、 白喉杆菌,以及绿脓杆菌、白念珠菌、表皮癣菌有杀灭作用,对其他革兰氏阴性菌和抗酸菌几乎无作用。培养基中的用量为0.0001%〜0.0003%。

13. 玫瑰红酸

别名蔷薇酸,分子式C₁₉H₁₄O₃,相对分子质量290.32;深红色结晶,有金属光泽;也有带深绿色金属样的黄棕色片;易溶于醇,呈金黄色溶液;溶于氢氧化钠或氢氧化钾溶液呈胭脂红色;是一种酸碱指示剂,pH值6. 8(黄)〜8.0(红);同时也是一种抑菌剂,主要抑制革兰氏阳性细菌生长发育。每1000mL培养基中的用量一般为0.05g〜0. 1g。

14. 溴化十六烷基三甲铵

白色微晶粉末,是一种季铵盐,有吸湿性,在酸性溶液中稳定,溶于水,易溶于乙醇,微溶于丙酮,几乎不溶于乙醚和苯;能溶解细胞膜,是一种阳离子去污剂;能抑制革兰氏阳性细菌和部分革兰氏阴性细菌,铜绿假单胞菌等假单胞菌属细菌对其耐受。每1000mL培养基的用量为0.2g〜0.3g。

15. 高浓度氯化钠

主要用于金黄色葡萄球菌培养基,因金黄色葡萄球菌能耐受7. 5%〜10%氯化钠浓度,而其他大部细菌生长发育受抑制。1000mL培养基中的用量为75g〜100g。

16. 醋酸铊

分子式是T1(CH₃COO)₃,是一种剧毒物质;常用于培养支原体的培养基,可抑制绝大多数细菌和真菌的生长发育。1000mL培养基的用量为0.1g〜0.5g。由于其购买难度较大,通常在支原体培养基中都不加入,用抗生素代替使用。

17. 丙酸钠

无色透明结晶或颗粒状结晶粉末,略有特殊气味。溶于水和乙醇,pH值为8. 5〜10. 5。可抑制霉菌、酵母菌及细菌等,在酸性pH值中效果最佳,通常与其他抑菌剂协同使用。 1000mL培养基的用量为0. 1g〜0. 5g。

18. 氯霉素

氯霉素是一种耐高温高压灭菌的抗生素,氯霉素对革兰氏阳性、阴性细菌均有抑制作用,且对后者的作用较强。其中对伤寒杆菌、流感杆菌、副流感杆菌和百日咳杆菌的作用比其他抗生素强,对立克次体感染如斑疹伤寒也有效,但对革兰阳性球菌的作用不及青霉素和四环素。其抗菌作用机制是与核蛋白体 50S 亚基结合,抑制肽酰基转移酶,从而抑制蛋白质合成。本品常用于真菌选择性分离或计数培养基,抑菌细菌的生长发育。每1000mL培养基中用量为0. 05g〜0. 1g。

19. 庆大霉素

庆大霉素是一种氨基糖苷类抗生素,主要用于抑制革兰氏阴性菌。庆大霉素能与细菌核糖体 30S 亚基结合,阻断细菌蛋白质合成。庆大霉素是为数不多的具热稳定性的抗生素。

对大肠埃希氏菌、产气杆菌、克雷伯氏杆菌、奇异变形杆菌、某些吲哚变形杆菌、绿脓杆菌、某些奈瑟菌、某些无色素沙雷杆菌和志贺氏菌等革兰阴性菌有抗菌作用。革兰阳性菌中,金黄色葡萄球菌对本品敏感,链球菌对本品耐药。厌氧菌、结核杆菌、立克次体、病毒和真菌亦对本品耐药。近年来,由于本品的广泛应用,耐药菌株逐渐增多,绿脓杆菌、克雷伯氏杆菌和沙雷杆菌、吲哚阳性变形杆菌对本品的耐药率甚高。对大肠埃希氏菌、产气肠杆菌、奇异变形杆菌、绿脓杆菌等革兰氏阴性细菌作用较强。每1000mL培养基中用量为 0. 005g〜0. 02g。

20. 两性霉素B

本品是一类多烯类抗真菌药。黄色或橙黄色粉末;无臭或几乎无臭,无味;有引湿性, 在日光下易被破坏失效。在二甲亚矾中溶解,在二甲基甲酰胺中微溶,在甲醇中极微溶解,在水、无水乙醇、三氯甲烷或乙醚中不溶。在中性或酸性介质中可形成盐,其水溶性增高但抗菌活性会下降。添加于培养基中,主要用于抑制霉菌和酵母菌等真菌生长发育。 每1000mL培养基中用量为0.01g〜0. 02g。

21. 多黏菌素 B 和 多黏菌素 E

为抗革兰阴性杆菌抗生素,具杀菌作用,对大多数革兰阴性杆菌有较强抗菌作用,对绿脓杆菌的作用更为显著,对大肠埃希氏菌、沙门氏菌、痢疾杆菌、流感杆菌、百日咳杆菌、产气肠杆菌及肺炎杆菌等也有良好的抑制作用。每1000mL培养基中用量为76700IU〜100000IU。

22. 放线菌酮

从产生放线菌酮的放线菌发酵液中提得的一种抗生素。无色晶体。熔点119°C〜 121°C。易溶于甲醇、乙醇和丙酮,微溶于水。耐酸、耐热。在碱性情况下易分解。对酵母菌、霉菌、原虫等病原菌等有抑制作用。对细菌无显著抑制作用。每1000mL培养基中用量为 0. 05g〜0. 1g。

23. 萘啶酮酸

主要对革兰氏阴性菌有效,对大肠埃希氏菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌及变形杆菌等,具抑菌和杀菌作用。其作用机制是抑制细菌脱氧核甘酸的合成。

24. 吖啶黄素

主要抑制革兰氏阳性菌的生长发育。常用于单核细胞增生增李斯特氏菌选择性增菌培养基。

25. 万古霉素

可抑制细菌细胞壁的合成,主要抑制革兰氏阳性菌生长发育,对金黄色葡萄球菌、化脓链球菌、肺炎链球菌等作用强,对难辨梭状芽孢杆菌、炭疽杆菌、白喉杆菌等作用也良好。与其他抗生素无交叉耐药性,极少有耐药菌株。

26. 甲氧苄胺嘧啶(TMP)

抗菌增效药,抗菌谱与磺胺药物相似而效力较强,对多种革兰氏阳性和阴性细菌有效。甲氧苄啶与磺胺药合用可使抗菌作用增强数倍至数十倍。该品主要用作磺胺类药的增效药。

27. 复达欣

其作用机制为影响细菌细胞壁的合成,本品对革兰阳性菌的作用与第一代头孢菌素近似或较弱;其中葡萄球菌、链球菌A 和 B群、肺炎链球菌对本品敏感。本品对革兰阴性菌的作用较强,对大肠埃希氏菌、肠杆菌属、克雷伯氏杆菌、柠檬酸杆菌、奇异变形杆菌、普通变形杆菌、流感嗜血杆菌(包括耐氨苄青霉素菌株)、脑膜炎球菌等有良好的抗菌作用。

28. 拉氧头孢

对多种革兰阴性菌有良好的抗菌作用。大肠埃希氏菌、流感杆菌、克雷伯氏杆菌、各型变形杆菌、肠杆菌属、枸橼酸杆菌、沙雷氏杆菌等常对本品高度敏感。对厌氧菌有良好的抗菌作用。常用于各种革兰氏阳性菌的分离培养基。每1000mL培养基用量为0.02g〜 0. 05g。

来源:《微生物培养基及其原材料质量控制 (赵贵明主编)》电子书说明:文章内容用于学习和交流,仅供参考!如文章涉及侵权或不愿我平台发布,请联系处理。



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