HEPENGBIO 细胞总游离胆固醇(FILIPIN)荧光染色试剂盒|价格/使用说明书

HEPENGBIO 细胞总游离胆固醇(FILIPIN)荧光染色试剂是一种旨在通过荧光染料(FILIPIN)

特异性与胆固醇结合,形成复合体,并产生蓝色荧光现象的 *而 *的*方法。该*经过精心改良、

成功实验证明的。主要适用于各种细胞(动物、人体等)或培养细胞中游离胆固醇分布的检测。广泛用于

细胞病理生理的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,荧光清晰。 *背景

胆固醇(cholesterol)是一类称之为固醇类(sterols)或聚类异戊二烯(polyisoprenoid)或三萜皂甙元(triterpene)

的多环化合物(polycyclic compound)。其分子式为 cholest-5-en-3β-ol。胆固醇以游离(free form)和脂化结

合(ester)两种形式广泛存在于所有动物组织中,主要以非脂化形式存在于细胞膜中。在膜功能和脂代谢

以及激素合成中起着重要作用。(FILIPIN)是一类由四种同分异构体的多烯抗生素(polyene

antibiotics)或多马霉素(polyene macrolide)的总称。源自于 S. FILIPINENSIS 细菌的培养液中。其分子式

为 C35H58O11,分子量为 654.8。与游离胆固醇结合形成聚集体或复合物。 产品内容

HEPENGBIO 清理液(Reagent A) 毫升

HEPENGBIO 固着液(Reagent B) 毫升

HEPENGBIO 抗干扰液(Reagent C) 毫升

HEPENGBIO 染色液(Reagent D) 毫升

产品说明书 1 份

保存方式

保存 HEPENGBIO 染色液(Reagent D)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在 4℃冰箱里;有效*

6 月

用户自备

荧光显微镜:用于样品染色后观察分析

实验步骤

一、 样本固着处理

2

1. 准备 1 个 48 孔细胞培养板的细胞或载波片的细胞

2. 小心抽去 48 孔细胞培养板里的培养液

3. 小心加入 xx 微升 HEPENGBIO 清理液(Reagent A),铺满整个样品表面

4. 小心移去 HEPENGBIO 清理液(Reagent A)

5. 重复实验步骤 3 至 4 二次

6. 小心加入 xx 微升 HEPENGBIO 固着液(Reagent B),铺满整个样品表面

7. 室温下孵育 30 分钟

8. 小心移去 HEPENGBIO 固着液(Reagent B)

9. 小心加入 xx 微升 HEPENGBIO 清理液(Reagent A),清洗样品表面

10.小心移去 HEPENGBIO 清理液(Reagent A)

11.重复实验步骤 9 至 10 二次

二、样本染色处理

1. 小心加入 xx 微升 HEPENGBIO 抗干扰液(Reagent C),铺满整个样品表面

2. 室温下孵育 10 分钟

3. 小心移去 HEPENGBIO 抗干扰液(Reagent C)

4. 小心加入 xx 微升 HEPENGBIO 染色液(Reagent D),铺满整个样品表面

5. 室温下孵育 30 分钟,避免光照

6. 小心移去 HEPENGBIO 染色液(Reagent D)

7. 小心加入 xx 微升 HEPENGBIO 清理液(Reagent A),清洗样品表面

8. 小心移去 HEPENGBIO 清理液(Reagent A)

9. 重复实验步骤 7 至 8 二次

10.小心加入 xx 微升 HEPENGBIO 清理液(Reagent A)

11.即刻在荧光显微镜下观察:激发波长:340nm;散发波长:430nm――胆固醇阳性呈现蓝色荧光

注意事项

1. 本产品为 50 次(48 孔细胞培养板)操作

2. 操作时,须戴手套

3. 操作时,避免污染母液

4. 试剂溶液在样品表面时,避免有气泡存在,同时*铺满样品表面

5. 样品染色完成后,即刻进行荧光显微镜观察

6. 荧光容易受到光漂白(photobleach),建议使用 HEPENGBIO 抗淬灭剂Ⅰ-12058.2

7. 本产品使用载玻片细胞染色后,可用于电镜分析

8. 本产品适合各种规格的培养细胞:载玻片,载玻片培养皿,35mm 培养皿,和各种培养孔板,须相应

调整处理液:

操作容器 建议处理液规格

载玻片 100 微升

载玻片培养皿 1 毫升

35mm 培养皿 1 毫升

96 孔培养板 100 微升

48 孔培养板 200 微升

3

24 孔培养板 500 微升

12 孔培养板 1 毫升

6 孔培养板 2 毫升

25cm2细胞培养瓶 3 毫升

9. 本公司提供系列组织细胞生物化学成分染色试剂产品

质量*

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定荧光清晰