在药品微生物检验工作中，无论是污染菌鉴定还是控制菌检查法的后续疑似菌鉴定，都会用到微生物的分离纯化技术—平板划线分离，划线分离的目的是将混杂存在的菌细胞尽可能的在培养基中分开生长，得到单个的纯菌落。然而，很多刚刚接触划线分离的检验人员分离划线的结果都不是很理想。今天我们为大家介绍一下，平板划线的常用方法以及注意事项，希望对大家有所帮助。

划线分离常用的方法有交叉划线法和连续划线法。

交叉划线法一般是在平板靠近边缘平行划线3-4条，转动平板，将接种环上剩余物烧掉（或更换接种环），通过第一次划线部分作第二次平行划线，同上操作，进行第三次划线（三区划线分离法）、第四次划线（四区划线分离法）。如上图，A区为菌源区，B/C为过渡区，D区为关键区，四区面积分配应是D>C>B>A，后一区与前一区首位相连，但A区不能与D区接触。

2、接种环一定要光滑，划线时接种环与培养基表面倾角在30度左右；

3、换区时建议更换接种环（或灼烧灭菌）。当然，操作熟练后，不换接种环也可连续划出较好的单菌落；

4、在下一区划线时，不宜从前面一区划取太大面积，1-2根平行线引出即可；

5、注意不要划破琼脂，划线不要太稀疏，以免造成浪费，分离效果不好。

6.交叉划线法也可以不一定划平行线，各区划线操作也可连续划线。

连续划线法一般是从平板边缘一点开始，连续做紧密波浪式划线，直到平板表面划满。连续划线建议密集但不紧凑，充分扩大单菌落存在区域。

当然，除了上述交叉划线法和连续划线法之外，还有很多的方法，例如曲线法、方格法、放射法、四格法等等等。

对于微生物检验人员来说，不管采用哪种方法什么形式，最终目的是要达到有多个单菌落。