1)常规指标分析。采用热提取法[15]提取EPS，EPS含量由PN和PS总含量表示；PS含量采用苯酚-硫酸法[16]测定；PN含量采用BCA(bicinchoninic acid)分光光度法[17]测定，其中EPS、PN和PS含量均以MLSS计；污泥Zeta 电位采用Zeta 电位分析仪(Zetasizer Nano ZS, Malvern)测定。

颗粒污泥表面相对疏水性(relative hydrophobicity, Rh)。RH的具体测定过程如下：取泥水混合液10 mL，用 pH为7的三羟基甲基氨基甲烷缓冲液清洗2次；置于冰水浴中，用超声波细胞破碎仪(JY92-IIN, SCIENTZ)在 48 W 条件下超声 2 min；将超声后的悬浮液与10 mL正十六烷在分液漏斗中混合、摇匀 5 min；静置 30 min后测定相关污泥浓度，污泥浓度采用国家标准方法[18]进行测定。RH[19]根据式(1)进行计算。

式中：Q0为原污泥浓度，mg·L−1；Q1为分液后水相中的污泥浓度，mg·L−1。

2) 3D-EEM分析。采用荧光光谱仪(FluoroMax-4, HORIBA Jobin Yvon)对EPS进行分析。激发波长(excitation wavelength，Ex)和发射波长(emission wavelength, Em)分别为220~400 nm和290~500 nm，增量均为 5 nm，激发和发射狭缝宽度为3.6 nm，扫描速度为1 200 nm·min−1，响应时间为0.1 s。采用origin 8.0软件进行数据处理。

3) FTIR分析。采用傅里叶变换红外光谱仪(Nicolet IS50, Thermofisher)对EPS溶液进行官能团测定。操作过程如下：将提取的EPS溶液置于−80 ℃的冷冻干燥机(Virtis 4K, VIRTIS)内冷冻干燥至无水；将干燥后的EPS和溴化钾以质量比为1∶100的比例研磨并混合均匀，混合粉末压片成型后用红外光谱仪以分辨率为4 cm−1，扫描次数为32次，在4 000~500 cm−1内进行扫描，用origin 8.0软件进行数据处理。

4)荧光染色和CLSM分析。用荧光染料对AGS进行染色，以观察AGS样品中PN、PS、活细胞和死细胞的分布，选用的荧光染料[20-21]如表3所示。染色后的AGS样品使用激光共聚焦显微镜(LSM 800 with Airyscan, Carl Zeiss)进行观察。