阿尔茨海默病(Alzheimers'Disease,AD)的主要症状是认知功能障碍以及学习、记忆能力的下降,其主要的病理学特征是脑内特别是在与学习、记忆功能密切相关的大脑皮层和海马等脑区沉积有高密度的老年斑。老年斑的主要成分是淀粉样β蛋白(Amyloidβ-protein,Aβ)。大量实验证实,Aβ具有广泛的神经毒性作用。AD病因的"Aβ学说”正是据此而提出的,AD患者出现的记忆功能下降很可能也正是Aβ发挥神经毒性作用的结果。 长时程增强(long-term potentiation,LTP)是由强直刺激作用于兴奋性突触传递通路诱发的一种突触传递效率长时间增强的现象,被公认为是一个很好的研究学习和记忆机制的细胞和电生理模型。近年来,包括我们在内的许多研究人员已就Aβ及其片段对海马LTP的抑制作用做了广泛报道。然而,Aβ及其片段对海马LTP的抑制作用机制还不完全清楚。研究表明,Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMK Ⅱ)是海马内含量最丰富的一种蛋白激酶。CaMK Ⅱ a亚单位基因突变或使用CaSK Ⅱ抑制剂后,小鼠空间学习能力将受到损伤,海马脑片上LTP的诱导也受到抑制。可见,CaMK Ⅱ的激活对基因表达、神经元可塑性、乃至学习记忆都起着至关重要的作用。长时程压抑(Long-term depression,LTD)是由低频刺激作用于兴奋性突触传递通路诱发的一种突触传递效率长时间减弱的现象,也被认为与大脑某些形式的学习过程有关,对清除旧记忆痕迹有着重要的作用。有证据表明CaMKⅡ也参与了LTD的诱导。 然而,采用电生理学方法诱导海马LTP/LTD的同时,是否一定存在有伴随LTP/LTD发生而出现的蛋白激酶组织化学即CaMKⅡ表达的变化还不清楚,特别是Aβ对LTP发生的抑制中是否伴随有CaMK Ⅱ的变化尚未见明确报道。因此,本研究在采用电生理手段记录大鼠海马CA1区场兴奋性突触后电位(fEPSP)的基础上,结合免疫组织化学技术同步测定海马脑片CaMK Ⅱ活性改变,探讨了LTP/LTD诱导与CaMK Ⅱ磷酸化水平的关系,以及CaMK Ⅱ在Aβ引起的在体海马LTP伤害中的作用,旨在为保护神经元和突触可塑性免受Aβ的伤害提供实验依据。结果显示： (1)在稳定记录大鼠海马CA1区场电位30 min的基础上,给予高频刺激(HFS)后,fEPSP的幅度即刻增加到(204.38±10.22)％,30分钟后仍然保持较高水平(162.37±5.5)％,这表明了在体海马LTP的成功诱导。同时,应用免疫组化技术,比较测试刺激组(n=6)和高频刺激对照组(n=6)海马脑片CA1区CaMK Ⅱ磷酸化水平的结果显示：测试刺激组免疫反应阳性产物染色较淡,平均灰度值为165.01±9.43;高频刺激对照组染色较深,平均灰度值为132.53±8.19,磷酸化水平显著强于测试刺激组(P