免疫共沉淀联合质谱分析筛选与HCMV IE86相互作用蛋白 |
您所在的位置:网站首页 › ie86 › 免疫共沉淀联合质谱分析筛选与HCMV IE86相互作用蛋白 |
喜欢
0
阅读量: 163 作者: 李朝华,胡明,钱冬萌,王斌 展开 摘要: 目的利用免疫共沉淀联合质谱分析的方法,在人胚肺成纤维细胞系MRC-5细胞和胶质瘤细胞系U87MG细胞中,筛选与人巨细胞病毒(HCMV)即刻早期蛋白IE86相互作用的病毒蛋白和剪接相关蛋白。方法通过HCMV感染细胞使IE86蛋白在细胞中表达,采用免疫共沉淀的方法富集两种细胞系中的IE86结合蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳分离免疫共沉淀复合物,从胶中切取IE86结合蛋白条带,胶内酶解后进行液相色谱-质谱联用分析及数据库检索,筛选与IE86相互作用蛋白。结果利用免疫共沉淀联合质谱分析,在MRC-5细胞中,共鉴定到与IE86相互作用的病毒编码的蛋白质17种,宿主细胞编码的剪接相关蛋白25种;在U87MG细胞中,共鉴定到病毒编码的蛋白质4种,宿主细胞编码的剪接相关蛋白8种。结论与胶质瘤细胞系U87MG相比,人胚肺成纤维细胞MRC-5中有更多种病毒蛋白及剪接相关蛋白与IE86有相互作用,协同参与IE86的剪接及病毒早、晚期蛋白的表达,这为进一步研究HCMV在不同细胞环境中的复制机制提供了基础。 展开 关键词: 巨细胞病毒 即早蛋白质类 免疫沉淀法 质谱分析法 蛋白质相互作用 年份: 2018 |
CopyRight 2018-2019 办公设备维修网 版权所有 豫ICP备15022753号-3 |