【保存条件】

室温避光保存，有效期至少一年

【概述】

苏木素染色(hematoxylin staining or haematoxylin staining)，也被称作苏木精染色，是最常用的组织和细胞的染色方法之一。无色的苏木素(hematoxylin)氧化后形成有醌环结构(quinoid ring)的氧化苏木素(hematein or haematein)，从而可以和三价的铝离子、铁离子等形成有颜色的带正电荷的复合物(如hematein-Al3+ complexes)。氧化苏木素(也称氧化苏木精)和铝离子等形成有色的复合物的过程也被称为Dye Lake Formation。细胞核内基因组DNA的双螺旋结构中，双链上的磷酸基团向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的氧化苏木素复合物结合，从而形成细胞核染色。苏木素染色液有多种不同的配制方法，不同的方法可以把细胞核染色成不同深浅的蓝色或蓝紫色。

伊红(eosin)是一种化学合成的酸性染料，在水中解离成带负电荷的阴离子，可以和蛋白质氨基上带正电荷的阳离子结合，从而使细胞胞浆染成不同程度的红色或粉红色，与苏木素染色液染色形成的蓝色细胞核形成鲜明对比，从而使苏木素伊红(HE)染色成为病理组织切片中最广泛使用的一种常规染色方法。

本试剂盒使用试剂为优化后的Mayer法配方，苏木素伊红染色后细胞核呈现蓝色，细胞浆呈现粉红色或红色。

【使用方法（仅供参考）】

1.样品处理 a.对于石蜡切片： 二甲苯（自备）中脱蜡5-10分钟；换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟；无水乙醇浸泡5分钟；90%乙醇浸泡2分钟；80%乙醇浸泡2分钟；70%乙醇浸泡2分钟。蒸馏水洗涤2分钟。 b.对于冰冻切片： 固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。 c.对于培养细胞： 固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。 2.苏木素伊红(HE)染色 对于上述处理好的样品： a.苏木素染色液染色1-5分钟(可以根据染色结果和要求调整时间，根据组织大小和厚度进行调整)。 b.蒸馏水洗去浮色，用适当的返蓝液浸泡样品10-60s（亦可用自来水中冲洗去多余的染色液，约10分钟）。 c.蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。 d.选做：根据不同分化液（自备）的分化时间，分化约2-30秒，自来水冲洗10分钟。 e.伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。  此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。 3.脱水、透明、封片观察 70%乙醇10秒，80%乙醇10秒，90%乙醇10秒，无水乙醇10秒。二甲苯透明5分钟。换用新鲜的二甲苯，再透明5分钟。用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察，细胞核呈蓝色，而细胞浆呈粉红色或红色。

【注意事项】

1. 染色后的分化为选做步骤，但分化后核质着色更清晰。

2. 染色液可以重复使用多次，认为效果不佳时再更换新的染色液。

3. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。

4. 伊红在水和梯度乙醇中会出现脱色，因此建议快速脱水。

5. 仅用于实验室，不适合农业/家庭/临床用途使用。

6. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。