碧云天的脂滴绿色荧光检测试剂盒(BODIPY 493/503)，英文名为Lipid Droplets Green Fluorescence Assay Kit with BODIPY 493/503，也称BODIPY 493/503 Staining Kit或Green Neutral Lipid Stain，是一种基于绿光探针BODIPY 493/503来检测细胞内脂滴(Lipid droplets)的试剂盒。本试剂盒适用于荧光显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪等荧光检测系统。

脂滴是由磷脂单分子层及甘油三酯(Triglyceride)、胆固醇酯(Cholesteryl ester，CE)组成的中性脂肪(Neutral lipid)疏水核心构成，广泛存在于动物、细菌、酵母、植物和昆虫细胞中[1]。脂滴能够沿着细胞骨架运动，并与其它细胞器相互作用，在脂类代谢与存储、膜转运、蛋白降解、以及信号传导过程中起着重要的作用。多种代谢性疾病，如肥胖、脂肪肝、心血管疾病及糖尿病、中性脂贮存性疾病和Niemann Pick C疾病等，可能都伴随着脂质贮存的异常[2]。

本试剂盒所使用荧光探针为BODIPY 493/503，CAS号为121207-31-6，分子量为262.11，其在磷脂(phospholipid)中最大激发光波长为493nm，最大发射光波长为503nm。BODIPY 493/503在磷脂中的激发光和发射光光谱参考图1。

图1. BODIPY 493/503在磷脂中的激发光和发射光光谱。

本试剂盒所使用荧光探针BODIPY 493/503在水和其它极性溶剂中几乎无任何荧光，一旦与甘油三酯等中性脂肪结合便发出明亮的绿色荧光。使用本试剂盒检测细胞内脂滴的效果参考图2。

图2. 脂滴绿色荧光检测试剂盒(BODIPY 493/503)检测HeLa细胞内脂滴的效果。图A为正常HeLa细胞在显微镜明场下的形态，正常细胞内无明显的脂滴聚集现象，因此经染色后呈较弱的绿色荧光(图B)，主要是细胞膜上脂类的染色；图E为使用油酸诱导后细胞在显微镜明场下形态，此时细胞内有很明显的脂滴聚集，细胞内脂滴被BODIPY 493/503染成明亮的绿色荧光(图F)。图C、G为细胞核染色效果，图D、H为脂滴和细胞核的叠加图。实际检测效果会因实验条件、检测仪器的不同而存在差异，本图仅供参考。

对于96孔板中的样品，按照每孔使用100μl染色液计算，本试剂盒的小包装和中包装可以进行1000次和5000次检测；如果用于流式细胞仪检测，按照每个样品的检测体系体积为0.5ml时，本试剂盒的小包装和中包装可以进行200次和1000次检测；对于6孔板中的贴壁培养细胞样品，按照每孔使用1ml染色液计算，本试剂盒的小包装和中包装可以进行100次和500次检测。

-20ºC避光保存，至少一年有效。BODIPY 493/503 (1000X)和Hoechst 33342 (1000X)须避光保存。

第一次使用时建议适当分装，避免反复冻融。

BODIPY 493/503的工作浓度、细胞量、孵育温度和时间等可根据所使用的细胞进行适当摸索和优化，例如BODIPY 493/503的浓度可在0.2X-2X之间适当调整。

BODIPY 493/503在激光照射下易发生淬灭，因此需要在保证荧光亮度的前提下尽可能降低染料使用浓度，降低荧光显微镜激发光强度，缩短拍照时间。

荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。