单细胞分析

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单细胞分析

2023-06-03 02:15| 来源: 网络整理| 查看: 265

10X genomics的基本原理 image.png

在这个教程中,主要将分析 10X Genomics 免费提供的外周血单核细胞 (PBMC) 数据集。在 Illumina NextSeq 500 上对 2,700 个单细胞进行了测序。可以在https://cf.10xgenomics.com/samples/cell/pbmc3k/pbmc3k_filtered_gene_bc_matrices.tar.gz此处找到原始数据。我们从读取数据开始。 Read10X() 函数从 10X 读取 cellranger 管道的输出,返回一个唯一的分子识别 (UMI) 计数矩阵。此矩阵中的值表示在每个单元格(列)中检测到的每个特征(即基因;行)的分子数。

Read10X() 函数是针对于整理好的10X Genomics 数据,如果手头的不是类似文件,可以将其进行转换,成为格式一致的文件。

接下来使用计数矩阵创建一个 Seurat 对象。该对象用作包含单细胞数据集的数据(如计数矩阵)和分析(如 PCA 或聚类结果)的容器。例如,count matrix存储在 pbmc[[“RNA”]]@counts 中。

library(dplyr) library(Seurat) library(patchwork) 创建对象 加载数据 # Load the PBMC dataset pbmc.data


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