作为一个生物相关专业的学生：经常有一些搞不懂的生物学常识6 |
您所在的位置：网站首页 › egfp蛋白大小 › 作为一个生物相关专业的学生：经常有一些搞不懂的生物学常识6 |
|
作为一个生物相关专业的学生：经常有一些搞不懂的生物学常识6---细胞—质粒 分子生物学实验室常见的细胞有哪些，英文名称是什么，使用哪些培养基，培养条件？常见的细胞株如下（按字母顺序排列）： A549 - 人类肺腺癌细胞 (ATCC® CCL-185)，使用 DMEM（Dulbecco’s Modified Eagle Medium）培养基，37℃，5% CO2。BHK-21 - 仓鼠肾细胞 (ATCC® CCL-10)，使用 DMEM 培养基，37℃，5% CO2。CHO - 中国仓鼠卵巢细胞 (ATCC® CCL-61™)，使用 F-12K (Kaighn's) Medium培养基，37℃，5% CO2。COS-7 - 绿猴肾细胞 (ATCC® CRL-1651™)，使用 DMEM 培养基，37℃，5% CO2。HeLa - 人类子宫颈癌细胞 (ATCC® CCL-2™)，使用 DMEM 培养基，37℃，5% CO2。HepG2 - 人类肝细胞癌细胞 (ATCC® HB-8065™)，使用 MEM（Minimum Essential Medium）培养基，37℃，5% CO2。HL-60 - 人类白血病细胞系 (ATCC® CCL-240™)，使用 RPMI 1640（Roswell Park Memorial Institute）培养基，37℃，5% CO2。Jurkat - 人类淋巴细胞系 (ATCC® TIB-152™)，使用 RPMI 1640 培养基，37℃，5% CO2。MCF-7 - 人类乳腺癌细胞系 (ATCC® HTB-22™)，使用 DMEM/F-12（Dulbecco’s Modified Eagle Medium/Nutrient Mixture F-12）培养基，37℃，5% CO2。MDCK - 犬肾细胞 (ATCC® CCL-34™)，使用 MEM 培养基，37℃，5% CO2。NIH/3T3 - 小鼠成纤维细胞 (ATCC® CRL-1658™)，使用 DMEM 培养基，37℃，5% CO2。PC12 - 大鼠嗜铬细胞瘤细胞系 (ATCC® CRL-1721™)，使用 DMEM 培养基，37℃，5% CO2。RAW264.7 - 小鼠巨噬细胞系 (ATCC® TIB-71™)，使用 DMEM 培养基，37℃，5% CO2。SH-SY5Y - 人类神经母细胞瘤细胞系 (ATCC® CRL-2266™)，使用 DMEM/F-12 培养基，37℃，5% CO2。SK-BR-3 - 人类乳腺癌细胞系 (ATCC® HTB-30™)，使用 McCoy’s 5A（Modified）Medium培养基，37℃，5% CO2。THP-1 - 人类单核细胞系 (ATCC® TIB-202™)，使用 RPMI 1640 培养基，37℃，5% CO2。U2OS - 人类骨肉瘤细胞系 (ATCC® HTB-96™)，使用 DMEM 培养基，37℃，5% CO2。Vero - 绿猴肾细胞 (ATCC® CCL-81™)，使用 DMEM 培养基，37℃，5% CO2。293T - 人类肾上皮细胞 (ATCC® CRL-3216™)，使用 DMEM 培养基，37℃，5% CO2。HCT116 - 人类结肠癌细胞系 (ATCC® CCL-247™)，使用 McCoy’s 5A 培养基，37℃，5% CO2。HeLa S3 - 人类子宫颈癌细胞系 (ATCC® CCL-2.2™)，使用 DMEM 培养基，37℃，5% CO2。HepaRG - 人类肝癌细胞系 (ATCC® HB-8065™)，使用 William's Medium E培养基，37℃，5% CO2。MDA-MB-231 - 人类乳腺癌细胞系 (ATCC® HTB-26™)，使用 DMEM 培养基，37℃，5% CO2。MEF - 小鼠胚胎成纤维细胞 (ATCC® SCRC-1040™)，使用 DMEM 培养基，37℃，5% CO2。Neuro-2a - 小鼠神经母细胞瘤细胞系 (ATCC® CCL-131™)，使用 DMEM 培养基，37℃，5% CO2。PANC-1 - 人类胰腺癌细胞系 (ATCC® CRL-1469™)，使用 DMEM 培养基，37℃，5% CO2。RPE-1 - 人类视网膜色素上皮细胞系 (ATCC® CRL-4000™)，使用 DMEM/F-12 培养基，37℃，5% CO2。Saos-2 - 人类骨肉瘤细胞系 (ATCC® HTB-85™)，使用 McCoy’s 5A 培养基，37℃，5% CO2。SF9 - 青蛾卵巢细胞 (ATCC® CRL-1711™)，使用 Grace's Insect Medium培养基，27℃。Sf21 - 青蛾卵巢细胞 (ATCC® CRL-1711™)，使用 Grace's Insect Medium培养基，27℃。以上是一些常见的细胞系及其培养条件，每种细胞系的要求可能会有所不同，例如培养基成分、pH值、培养时间等。在进行实验前应仔细了解每个细胞系的特点及其对实验的影响，并严格按照要求进行培养。分子生物学实验室常见的质粒30个。pUC19 - 用于克隆和高效表达目的基因。pBluescript II SK(+) - 用于克隆和测序。pET-28a(+) - 用于高效表达目的基因，并具有His标签。pGEX-6P-1 - 用于高效表达目的基因，并具有GST标签。pET-32a(+) - 用于高效表达目的基因，并具有Trx和His标签。pCMV-Tag2B - 用于表达带有Flag和Myc标签的蛋白。pcDNA3.1(+) - 用于哺乳动物细胞中表达目的基因。pEGFP-C1 - 用于表达带有GFP标签的蛋白。pEGFP-N1 - 用于表达带有GFP标签的蛋白。pEGFP-N2 - 用于表达带有GFP标签的蛋白。pEGFP-N3 - 用于表达带有GFP标签的蛋白。pEGFP-N4 - 用于表达带有GFP标签的蛋白。pEGFP-Nuc - 用于表达带有核定位信号的GFP标签蛋白。pRSET A - 用于高效表达目的基因，并具有6xHis标签。pET-15b(+) - 用于高效表达目的基因，并具有Nus标签。pET-21a(+) - 用于高效表达目的基因。pLenti-CMV-GFP-2A-Puro - 用于慢病毒载体构建，表达带有GFP标签的蛋白。pMD18-T - 用于PCR克隆和测序。pUC57 - 用于基因克隆和DNA合成。pGEM-T Easy - 用于PCR克隆和测序。pQE-30 - 用于高效表达目的基因，并具有His标签。pQE-31 - 用于高效表达目的基因，并具有6xHis标签。pQE-32 - 用于高效表达目的基因，并具有GST标签。pQE-80L - 用于高效表达目的基因，并具有S-Tag标签。pCAGGS - 用于哺乳动物细胞中表达目的基因。pCI - 用于哺乳动物细胞中表达目的基因。pRSFDuet-1 - 用于高效表达目的基因。pETDuet-1 - 用于高效表达目的基因。pACYC184 - 用于质粒复制和高效表达目的基因。pBAD - 用于高效表达目的基因，并受AraC调控。这些质粒的具体作用包括： 克隆：pUC19、pBluescript II SK(+)、pMD18-T、pUC57、pGEM-T Easy这些质粒主要用于克隆和测序，其中pUC19还可用于高效表达目的基因。高效表达：pET-28a(+)、pGEX-6P-1、pET-32a(+)、pRSET A、pQE-30、pQE-31、pQE-32、pQE-80L、pRSFDuet-1、pETDuet-1、pACYC184、pBAD这些质粒主要用于在大肠杆菌中高效表达目的基因，其中有些质粒还具有特定的标签如His、GST、Trx、Nus等，以便后续蛋白纯化。标记：pCMV-Tag2B、pEGFP-C1、pEGFP-N1、pEGFP-N2、pEGFP-N3、pEGFP-N4、pEGFP-Nuc这些质粒主要用于标记目的蛋白，其中pCMV-Tag2B可用于表达带有Flag和Myc标签的蛋白，pEGFP系列质粒可用于表达带有GFP标签的蛋白，pEGFP-Nuc可用于表达带有核定位信号的GFP标签蛋白。慢病毒载体：pLenti-CMV-GFP-2A-Puro这个质粒用于慢病毒载体构建，以表达带有GFP标签的蛋白。总之，这些常用质粒在分子生物学实验室中有广泛的应用，可以帮助研究者进行克隆、表达、标记等实验。质粒命名、分类，并举一些例子质粒是指独立于染色体的小环状或线性的DNA分子，在原核生物细胞内自主复制和遗传的DNA分子。根据功能和结构的不同，质粒可以分为多种类型，以下是一些常见的质粒类型及其命名规则： 克隆载体：用于DNA片段的克隆和扩增，通常以p开头，后跟克隆载体的信息，如pUC19、pBluescript II SK(+)、pET-28a(+)等。表达载体：用于高效表达蛋白，通常以p或者pcDNA开头，后跟表达载体的信息，如pET-28a(+)、pcDNA3.1(+)、pGEX-6P-1等。标记载体：用于标记蛋白，通常以p或者pCMV开头，后跟标记载体的信息，如pCMV-Tag2B、pEGFP-C1、pEGFP-N1等。RNAi载体：用于RNA干扰实验，通常以p或者pSUPER开头，后跟RNAi载体的信息，如pSUPER、pLKO.1等。CRISPR/Cas9载体：用于基因编辑实验，通常以p或者pX330开头，后跟CRISPR/Cas9载体的信息，如pX330-U6-Chimeric_BB-CBh-hSpCas9、pSpCas9(BB)-2A-GFP等。除此之外，还有一些具有特殊功能的质粒，如慢病毒载体pLenti系列、质粒稳定细胞系构建载体等 质粒的分类质粒是细胞外染色体以外的小环状DNA分子，它们在细胞内可以自主复制，并且可以在细胞之间传递。按照它们的来源和功能，质粒可以被分类为以下几种：天然质粒：存在于自然界中的质粒，可以在细菌、古菌和真核生物中发现。它们通常是在自然选择的压力下演化形成的，以帮助细胞在特定的环境中生存。人工质粒：通过人工合成或改造天然质粒而制成的质粒，包括克隆载体、表达载体、慢病毒载体等。病毒质粒：病毒的遗传物质可以是质粒，例如慢病毒、腺病毒等。大肠杆菌F质粒：F质粒是一种特殊的质粒，可以在大肠杆菌中进行垂直遗传。它们是一种可以在大肠杆菌细胞间进行水平转移的质粒，可以在群体中快速传播抗生素抗性等有利特征。此外，根据质粒的功能和结构，还可以将它们进一步分类，例如：表达载体、克隆载体、启动子载体、慢病毒载体、转录因子诱导载体等。质粒命名、分类，并举一些例子质粒是细菌和其他单细胞生物质体中发现的圆形或线性的DNA分子。质粒通常具有自主复制的能力，可以独立于宿主细胞的染色体复制。质粒在分子生物学和生物工程学中被广泛应用，可以用于克隆、表达、标记和传递目的DNA序列。在命名上，质粒通常以p为前缀，后面接它的来源、大小、功能、使用等特征。例如，pBR322表示质粒来源于Escherichia coli（B），大小为3.2 kb，具有ampicillin和tetracycline的抗性基因，可用于克隆和表达目的DNA序列。另外一些常见的质粒命名包括pUC18、pUC19、pGEX-6P-1、pET-28a(+)等。根据质粒的分类方法不同，可以将质粒分为以下几类：克隆质粒：主要用于DNA序列的克隆、扩增和传递，如pBR322、pUC18、pUC19等。表达质粒：用于目的基因在细胞中的高效表达，如pET-28a(+)、pGEX-6P-1、pRSET A等。标记质粒：用于目的蛋白的表达和标记，如pEGFP-C1、pCMV-Tag2B等。病毒载体质粒：用于构建慢病毒和快病毒载体，如pLenti-CMV-GFP-2A-Puro、pAAV-CMV-GFP等。其他质粒：如质粒基因组库、转座子载体等。举例来说，pBR322是一个常用的克隆质粒，具有ampicillin和tetracycline的抗性基因，可以用于克隆目的DNA序列。pUC18和pUC19也是常用的克隆质粒，具有luciferase的报告基因和多个限制酶切位点，可用于分子克隆和筛选。pGEX-6P-1是一个常用的表达质粒，具有GST标签和TEV酶切位点，可用于目的基因在大肠杆菌中的高效表达和纯化。pEGFP-C1是一个常用的标记质粒，具有GFP标签和CMV启动子，可用于目的蛋白的表达和标记。细胞的命名规则及分类，举一些例子细胞的命名规则通常包括三部分：属名、种加词和菌株名。其中，属名是大写字母开头的拉丁化单词，表示该细胞属于哪个属；种加词是小写字母开头的单词或缩写，表示该细胞的特征；菌株名通常由数字或字母组成，表示不同的菌株。细胞的分类方法包括形态学分类、生理生化分类、遗传分类等。以下是一些常见的细胞分类和命名的例子：大肠杆菌 Escherichia coli：属于革兰氏阴性菌，常见于肠道和环境中，具有发酵和呼吸代谢能力，是分子生物学实验室中常用的宿主菌株。酵母菌 Saccharomyces cerevisiae：属于真菌，常见于自然环境和发酵食品中，具有发酵代谢能力，是分子生物学实验室中常用的宿主菌株。肝细胞 HepG2：属于人类肝癌细胞系，具有癌变特征，可用于肝癌相关的分子生物学和药物研究。HEK293T：属于人类胚胎肾细胞系，具有高效的DNA转染和蛋白表达能力，是分子生物学实验室中常用的宿主细胞。CHO细胞：属于哺乳动物细胞，具有优良的生长和表达性能，可用于蛋白表达和生物制药研究。293FT：属于HEK293细胞系的改良菌株，具有更高的转染效率和稳定性，可用于大规模的蛋白表达和制备。A549：属于人类肺癌细胞系，可用于肺癌相关的分子生物学和药物研究。RAW264.7：属于小鼠巨噬细胞系，具有巨噬细胞的免疫功能，可用于免疫学和炎症相关研究。COS-7：属于非洲绿猴肾细胞系，具有较高的DNA转染和蛋白表达能力，可用于分子生物学和生物制药研究。 |
今日新闻 |
推荐新闻 |
| CopyRight 2018-2019 办公设备维修网 版权所有 豫ICP备15022753号-3 |