髓细胞条件性METTL3基因敲除小鼠的构建与鉴定 |
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阅读量: 192 作者: 陶佳嫦,秦国慧,李玲,张毅 展开 摘要: 目的:构建髓细胞条件性METTL3基因敲除小鼠模型.方法:将Lyz2-cre^((+/+))雌性小鼠与METTL3^((flox/flox))雄性小鼠杂交,得到METTL3^((flox/-))Lyz2-cre^((+/-))杂合子小鼠,该杂合子小鼠自交,得到METTL3^((flox/flox))Lyz2-cre^((+/+))小鼠.提取小鼠鼠尾组织DNA,经PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳和DNA序列测定,在DNA水平判断小鼠基因型;提取小鼠骨髓细胞RNA,利用RT-PCR法检验METTL3的敲除效率;利用成像流式细胞仪在蛋白水平分析髓细胞中METTL3的敲除效率.结果与结论:在DNA,RNA和蛋白水平分别验证了髓细胞条件性METTL3基因敲除小鼠模型构建成功,该小鼠存活并且可育,为研究METTL3在髓源抑制性细胞功能中的作用提供了研究平台. 展开 关键词: METTL3基因 基因敲除小鼠 cre/loxp小鼠 髓源抑制性细胞 年份: 2022 |
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