建议用不加酚红的，这里的trypsin是用于坚硬组织的软化，消化细胞的胰酶中的酚红的作用其实主要是起到PH指示剂的作用，该试剂盒实验不需要酚红进行指示，所以应选不含酚红的胰酶。

对于 100 mg质地较硬的组织（如胃组织，骨骼肌组织），用0.25 mg/mL胰蛋白酶冰上消化 5-10 min（孵育时间因不同组织而不同），用 1 mL冰冷的裂解液B洗涤样品一次，移除上清液，加入新鲜冰冷的 1 mL裂解液B，将样本转移至预冷的 Dounce 匀浆器并于冰上匀浆样本（通常为 20-30 次研磨）。如有疑问，请联系[email protected]。

使用新鲜的动物组织，通常要求动物处死后不超过一小时，并且保存在冰上的组织。请勿使用经过冷冻保存的组织。

使用混合蛋白酶抑制剂比较合适，推荐Abbkine的BMP1001蛋白酶抑制剂（100X），该抑制剂是一种通用型的蛋白酶抑制剂，效果很好。

建议按照说明书中硬组织的处理方法用胰酶进行组织消化，然后在冰上研磨。

本试剂盒提取的线粒体通常可以应用于较多实验研究，如线粒体呼吸、线粒体膜电位、细胞凋亡、mtDNA和mtRNA以及线粒体蛋白组等。

因为组织样本较容易破碎，手动匀浆即可。如使用组织匀浆机等机械匀浆法，很难把控力度，可能会造成线粒体损伤，因此不建议使用。