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作者：

生物物理系，魏代玉

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摘要：

综上所述,三种方法同时各自具有局限性.晶体学方法对样品制备要求很高,很多蛋白 质难以得到三维或二维晶体,对于膜蛋白和大质量的分子和复合体的结晶尤其困难,而且不 同蛋白质的结晶条件很不同,摸索起来十分费时费力.此外,获得高度有序的三维晶体对于 解析它们的原子分辨率固然有利,但是在生理条件下蛋白质及核酸等生物大分子的结构是否 完全与其在晶体状态中的一样,至今还是人们普遍关心的问题.相位问题也是晶体学的一个 难点.核磁共振方法虽然可以精确解析溶液中的分子结构,避开了结晶的困难,也接近生理 状态,但是它能解析的分子质量有限制.三维电镜技术不需要结晶,没有相位问题,最新发 展的冷冻制样技术使样品更好的保持在生理状态,且没有分子量限制,甚至细胞也可以进行 三维重构.虽然现阶段分辨率没有上面两种方法高,但是随着电镜设备本身的进步,制样技 术的提高,图像处理技术的进步,分辨率水平正在不断提高中.而且,可以将晶体分析和核 磁共振得到的高分辨率单体和电镜技术得到的较低分辨率的分子复合体结合起来进行分析, 研究分子相互作用及其分子的构像变化.

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