蛋白表达及纯化：

1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。

3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容：纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。

产品属性：

产品名称

物种

货号

钙蛋白酶10(CAPN10)重组蛋白小鼠

Mus musculus (Mouse，小鼠)

GOY-01D1515

英文名称：Recombinant Calpain 10 (CAPN10)

Calcium-activated neutral proteinase 10

型号：GOY-01D1515

酶与激酶

物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平： 97%

等电点：-

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相关产品：

前蛋白转化酶枯草溶菌素1(PCSK1)重组蛋白英文名称：Recombinant Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 1 (PCSK1)PC1, PC3, SPC3; NEC1; Prohormone Convertase 3; Prohormone Convertase 1; Neuroendocrine Convertase 1; Proprotein Convertase 1物种：Human，人

蛋腺苷转移酶Ⅰα(MAT1a)重组蛋白英文名称：Recombinant Methionine Adenosyltransferase I Alpha (MAT1a)MAT; SAMS; MATA1; SAMS1; AMS1; S-Adenosylmethionine Synthetase; S-adenosylmethionine synthase isoform type-1物种：Rat，大鼠

前列腺特异性膜抗原(PMSA)重组蛋白英文名称：Recombinant Prostate-specific Membrane Antigen (PMSA)FOLH1; PSM; FGCP; FOLH; GCP2; NAALAD1; GCPII; mGCP; NAALADase I; Glutamate Carboxypeptidase II; Folate Hydrolase 1; Folylpoly-gamma-glutamate carboxypeptidase物种：Mouse，小鼠

操作步骤：

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．  每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

细胞数量

Lysis Buffer加入量

107个

0.5 mL～1 mL

5×106个

0.2 mL～0.5 mL

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品：

CD73抗体 CD73/NT5 0.2ml

酰基结合结构域蛋白6抗体 ACBD6 0.2ml

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钙蛋白酶10(CAPN10)重组蛋白小鼠革兰氏染色液试剂盒4×10ml盒

Lovastatin 75330-75-520mg

植物基因组50T盒

细胞过滤筛(不锈钢)180目个

PVDF膜(0.22um) 13.25cm×15cm13.25×15张

Liriopesides B 山麦冬皂苷B182284-68-020mg

Ethidium Brmide 溴化乙锭 (EB)100mg支

Betulinaldehyde 白桦脂醛13159-28-920mg

Cutosine β-D- 阿糖胞苷50mg瓶

30%丙烯酰胺(29:1)100ml瓶

Artemisinin 素5g瓶

姬姆萨工作液100ml瓶

Sephadex G-25 medium 葡聚糖凝胶G-2525g瓶