一种耐盐型酵母的提取方法及应用专利检索

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一种耐盐型酵母的提取方法及应用专利检索

2024-07-17 22:46| 来源: 网络整理| 查看: 265

1.一种耐盐型酵母的提取方法,其特征在于,所述具体提取方法包括:样品选择:在发酵罐中,取未搅拌的酱醪表面往下5到10厘米的部分做样本,备用;培养基配置:取已制备的培养基A,备用;从酱油池中取生酱油10‑30g、盐25‑30g,水70‑90g,装于锥形瓶标记为培养基B,备用;消毒处理:将培养基A、B分别进行密封,放入高压灭菌锅121℃灭菌,灭菌时间不可超过5min,然后置于70℃水浴中备用;试剂配制:事先配制并灭菌处理的15%浓度盐水9mL的试管若干支、15%浓度盐水90g锥形瓶若干个,冷却备用;培养皿制备:将锥形瓶培养基B混合物倒入锥形瓶培养基A中,培养基A在磁力搅拌器上搅拌均匀,然后移至到超净工作台上,在酒精灯火焰旁趁热迅速倒入标记好的培养皿中,敞开培养皿盖,打开风机加快其凝固,冷却干燥后盖上培养皿盖备用;‑1悬浊液制作:将酱醪样品10g加入含有90g15%食盐水的锥形瓶中,混匀制成10 悬浊液‑2a;再吸取悬浊液a1ml,滴入含有9ml 15%食盐水的试管中混匀稀释,制成10 悬浊液b、同理‑3 ‑4配制出10 悬浊液c、10 悬浊液d;培养皿接种:将悬浊液a、悬浊液b、悬浊液c和悬浊液d各吸取0.1ml分别涂抹于标记好的培养皿平板上,每个样液都需制备平行样,完成后四个培养皿为一组,倒置于培养箱中,30℃恒温培养;选择菌种:连续培养6天,观察酵母菌落生长情况,并记录,挑选酵母菌长势较好的培养皿,挑取菌落于新培养皿平板划线纯化,放置于培养箱培养;挑取纯化后长势较好的酵母菌接种于事先准备好的保存培养试管里,置于30℃培养箱培养,培养四到五天后,当酵母菌菌落已长好,则转移到6℃冰箱冷藏保存,至此完成酵母提取制备。2.如权利要求1所述的一种耐盐型酵母的提取方法,其特征在于,所述培养基A的成份为葡萄糖1‑10g、酵母粉0.1‑2g、多聚蛋白胨0.1‑1g、磷酸二氢钾0.1‑2g、琼脂粉1‑8g、水70‑90g、搅拌转子一个。3.如权利要求2所述的一种耐盐型酵母的提取方法,其特征在于,所述搅拌件采用四氯乙烯材料制成。4.如权利要求1所述的一种耐盐型酵母的提取方法,其特征在在于,所述酵母粉为酱油酵母。5.如权利要求1所述的一种耐盐型酵母的提取方法,其特征在于,所述酵母提取的过程中,需要制备好的15%浓度的盐水9ml的试管若干,盖好硅胶塞,15%浓度盐水90g的锥形瓶若干个,锡纸密封好、移液管若干、培养皿若干、涂布棒若干、药勺若干,且需要全部放置于高压灭菌锅121℃灭菌15分钟。6.如权利要求1所述的一种耐盐型酵母的提取方法,其特征在于,所述发酵罐内的酱醪制作步骤包括:①制曲:将小麦粉、蒸煮豆粕和种曲按比例进行混合后送至圆盘制曲室,制曲过程通过风机空调系统调节供氧量、湿度和温度。②制醪:将成曲拌入定量的冷却盐水,成为生醪送至发酵罐,制成酱醪。7.一种耐盐型酵母的应用,其特征在于,将上述提取的酵母进行扩大培养,将扩大培养制成的酵母液,加入发酵罐中,和酱醪一起发酵酿造。8.如权利要求7所述的一种耐盐型酵母的应用,其特征在于,所述发酵罐搅拌方式为:①每批料投料完毕,须进行1次10分钟搅拌。②第2—6天,隔天进行1次20分钟搅拌。③第10—60天,每周进行1次15分钟搅拌。④第60天,酵母添加时,进行1次30min搅拌,持续3天。⑤第60—120天,每5天进行1次10min搅拌。⑥第120天,酱醪充分溶解后,每过15天进行1次5min搅拌。9.如权利要求7所述的一种耐盐型酵母的应用,其特征在于,所述发酵罐温度设置在28~32℃。



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