DNA的粗提取与鉴定实验是高考大纲中考点之一，但没有出现在必修和选修三中，非常容易被忽略，把考试要点列出来，赶紧学习一下。

提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA的粗提取而言，就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。1. DNA的溶解性DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。2. DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60—80oC的高温，而DNA在80oC以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。3. DNA的鉴定在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。4. 实验材料的选取凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但是使用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大。5. 破碎细胞，获取含DNA的滤液在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞，加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。6. 去除滤液中的杂质方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质，不分解DNA；方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同。特别提醒：①为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。②方案二与方案三的原理有什么不同？方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开；方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分离。7. DNA的析出与鉴定将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。8. 以血液为实验材料时每100ml血液中需要加入3g柠檬酸钠防止血液凝固。9. 二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。10. DNA的溶解度与NaCl溶液浓度的关系：当NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时，随浓度的升高，DNA的溶解度降低；当NaCl溶液浓度高于0.14mol/L时，随浓度升高，DNA的溶解度升高，实验选用2mol/lNaCl和0.015mol/lNaCl做溶解试剂。11. 盛放鸡血细胞液的容器最好是塑料容器。▐ 来源：高考生物D：gksw100，如有侵权，请联系删除！

DNA的粗提取与鉴定实验是高考大纲中考点之一，但没有出现在必修和选修三中，非常容易被忽略，把考试要点列出来，赶紧学习一下。

提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA的粗提取而言，就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。

1. DNA的溶解性

DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。

2. DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性

蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60—80oC的高温，而DNA在80oC以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。

3. DNA的鉴定

在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

4. 实验材料的选取

凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但是使用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大。

5. 破碎细胞，获取含DNA的滤液

在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞，加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。

6. 去除滤液中的杂质

方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质，不分解DNA；方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同。

特别提醒：

①为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？

用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。

②方案二与方案三的原理有什么不同？

方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开；方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分离。

7. DNA的析出与鉴定

将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。

8. 以血液为实验材料时

每100ml血液中需要加入3g柠檬酸钠防止血液凝固。

9. 二苯胺试剂

要现配现用，否则会影响鉴定的效果。

10. DNA的溶解度与NaCl溶液浓度的关系：

当NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时，随浓度的升高，DNA的溶解度降低；当NaCl溶液浓度高于0.14mol/L时，随浓度升高，DNA的溶解度升高，实验选用2mol/lNaCl和0.015mol/lNaCl做溶解试剂。

11. 盛放鸡血细胞液的容器

最好是塑料容器。

附加高三生物全年复习计划

历年高考都很好的体现了大纲中对生物学核心知识的考核。因此，在充分理解、掌握课 标、考纲的基础上，要学会读书，通读教材，包括文字部分、插图、小资料、实验等；重要 的生物学概念、生理作用、生理过程、实验原理、实验方法等要理解熟记。对生物学中的一 些名词性概念、结论性语句要经常理解性记忆，以保证准确无误，才能够用准确的生物学术 语答题。在基础训练时，注重构建知识网络，同时注重创新方法，对典型例题要精讲精练， 提高学生答题的技巧、速度和准确度，注重对知识的归纳总结和整理。

基础训练不是只多做题就足够了，要做典型例题，并且要善于在错误中总结经验，能够 在经验中整合知识，最终达到融会贯通的境界。

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