Protein Thermal Shift 软件 v1.4 开发用于直接分析 Applied Biosystems™ 实时荧光定量 PCR 仪器文件中的蛋白熔解荧光读数。不同的蛋白将具有不同的 Protein Thermal Shift 表达谱，各自具有独特的蛋白熔解曲线形状、斜率、信噪比和温度熔解范围（有关示例，请参见右图）。Protein Thermal Shift 软件通过两种方法从这些曲线生成一个或多个熔解温度值 (Tm)：Boltzmann 派生的 Tm 和衍生曲线确定的 Tm，在不同检测条件下，用作曲线间的比较点并表示蛋白质的相对热稳定性。生成 Tm 值的两种方法 Boltzmann 方法将自动（或手动）识别的熔解区域内的数据与生成 Tm 的两态 Boltzmann 模型拟合。通常，对于具有单个熔解结构域的蛋白质，使用 Boltzmann 方法。然而，对于具有多个熔解结构域的蛋白质，可以使用衍生曲线法。衍生曲线法使用数计算的原始数据的二阶导数来估计衍生表达谱中可能出现至多六个峰（本地最大值）的温度。根据经验得出的信噪比阈值用于确定将检测的本地最大值。与我们的实时荧光定量 PCR 系统兼容Protein Thermal Shift 分析软件与下列实时荧光定量 PCR 系统生成的运行文件兼容：QuantStudio 1、3、5、6 Flex、6 Pro、7 Flex、7 Pro 和 12K Flex、StepOne、StepOnePlus、7500、7500 Fast 和 ViiA 7。使用我们的 Protein Thermal Shift™ 试剂盒制备您的样品Protein Thermal Shift 入门试剂盒或 Protein Thermal Shift 染料试剂盒（单独提供）可制备您的分析样品。这些试剂盒允许用户采用与暴露的疏水残基结合的染料，使用实时荧光定量 PCR 仪器监测蛋白的热稳定性，以确定稳定目标蛋白的缓冲条件或筛选结合目标蛋白的化合物的配体库。