★ BioMag-SA     GST标签蛋白纯化磁珠

一、概述：                                                     

百迈格生物GST融合蛋白纯化磁珠（50μm）是专为高效、快速纯化谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白而设计的， 把含有GST 标签的融合蛋白添加到GST磁珠中，在经过短暂的孵育后，重组蛋白质将被吸附到GST磁珠上。接下来可以使用磁珠分离架把融合蛋白洗脱下来。磁分离技术消除了微管的变化、**简化纯化工艺和提高纯化效率，减少目的蛋白损失，适合科研和工业领域便捷地进行GST融合蛋白的纯化。

该产品为粒径更小的50μm琼脂糖磁珠，比传统的聚苯乙烯或者二氧化硅具有很好的分散性能，更低的非特异性结合，可多次重复使用。

二、产品规格：

配体

GSH谷胱甘肽

货号

BMGST-5/BMGST-10

磁珠基质

超顺琼脂糖磁珠

粒径大小

50μm

包装

5ml/10ml/其他

浓度

10%(V/V)

结合量（每克磁珠）

6-10mgGST融合蛋白/ml（1ml的磁珠固体体积）

建议pH使用范围

1-12

沉降系数

3-6s

保存液

20%乙醇水

保存

2-8℃，禁止冷冻，使用前请充分混匀

电镜图

三、通用使用方法

上样Buffer/结合洗涤液 Buffer: 1x PBSpH= 7.4。

10mM Na2HPO4，1.8mM KH2PO4，140mM NaCl，2.7mM KCl，调节pH值至7.4。

洗脱Buffer: 10mM GSH（还原型谷胱甘肽）,50mM Tris pH 8.0。

10mM Glutathione（还原型），50mM Tris-HCl，调节pH值至8.0。因Glutathione易氧化，需现用现配。

1 细胞破碎液准备

按每克湿重菌体/2~5ml上样Buffer的比例充分悬浮离心收集的菌体；600w功率，每循环超声3s，冷却3s，循环99×3次,破碎菌体；4℃、15000rpm离心15m，收集上清液，或用0.45μm滤膜过滤。(也可以使用其他方法进行细胞破碎，以达到让GST融合蛋白释放出来的目的）

2 使用前准备

2.1.充分摇匀磁珠。

2.2.取 100μl 磁珠到一个干净的管中。

2.3.把管放置在磁力架上收集磁珠，去上清液。

2.4.加入 1ml 上样 Buffer 充分混匀后，放置在磁力架上收集磁珠，去上清液。重复该次步骤 2 次。

3 融合蛋白结合及洗涤

3.1.用 100μl 的上样 Buffer 重新悬浮磁珠。

3.2.加入含有 GST 标签重组蛋白的样品轻轻混匀。

3.3.放置在振荡器或摇床中在室温下孵育 30-60min（如果重组蛋白在室温下不稳定，可以在 4℃进行）。

3.4.把孵育后的小管放置在磁力架上收集磁珠，去上清液。如果有需要可保留上清，另作检测。

3.5.加入 1ml 上样 Buffer 充分混匀后，放置在磁力架上收集磁珠，去上清液。重复该次步骤至少 3 次。

4 目的蛋白洗脱

4.1.加入 100μl 洗脱 Buffer 重新悬浮磁珠，放置在振荡器上室温震荡 5min

4.2.使用磁力架收集磁珠，把上清转移到另一个干净的管中。

4.3.重复步骤 1 和步骤 2.