PAGE胶蛋白回收试剂盒

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PAGE胶蛋白回收试剂盒

2024-07-17 15:56| 来源: 网络整理| 查看: 265

十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)不仅可用于检测蛋白质的相对分子质量,而且也是分离纯化蛋白质的重要工具之一,随着蛋白质技术的微量化,有必要从凝胶中回收蛋白质以用于制备抗体、免疫印迹、氨基酸组分分析或末端序列测定等。本制品就是专门为此用途开发的微量蛋白胶回收的试剂盒。

简单,不需要复杂而昂贵的仪器(如电洗脱仪)。适用于变性胶(SDS-PAGE)和非变性胶。回收率一般在50~90%之间(跟蛋白质大小,洗脱时间相关)。跟后续的实验兼容,包括2-D电泳、质谱测序等。

组分规格蛋白胶微量纯化溶液A10mL蛋白胶微量纯化溶液B50mL专用研磨杵50只保存:室温,有效期1年。

按常规方法进行变性(SDS-PAGE)或非变性蛋白电泳。切取含目的蛋白的胶(尽可能地把多余的胶切除,否则会影响回收效率)。固定和染色后蛋白回收效果很差,所以建议把样品分多孔上样,电泳后只切其中一个样孔的胶条进行固定和染色,然后将此胶条放回到在整体胶中原来的位置,通过显色胶条上的蛋白条带找到在未染色胶上对应区域,并切下此区域的胶进行回收。将切下的胶块转移到1.5mL塑料离心管中。用研磨杵充分将胶块压磨成尽可能细小的碎片。加入200μL蛋白胶微量纯化溶液A,4℃摇晃洗脱至少2~16小时(过夜)。此时最好将蛋白胶微量纯化溶液B放在冰箱预冷。10000g离心10分钟,转移上清到新的离心管中,注意不要吸取碎胶。加入5倍体积的预冷的蛋白胶微量纯化溶液B,摇晃混匀。-20℃放置至少10~30分钟。室温12000g离心5~20分钟,弃上清。室温充分晾干,得到的沉淀即为回收的蛋白质。回收的蛋白质可溶解在适当的缓冲液中,可用于后续实验(2-D电泳、质谱测序等)。相关搜索:PAGE胶蛋白回收试剂盒,PAGE胶蛋白回收,SDS-PAGE凝胶,非变性PAGE凝胶,凝胶蛋白纯化,胶蛋白回收,PAGE Gel Protein Mini Extraction Kit


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