教学笔记82

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2024-07-14 18:36| 来源: 网络整理| 查看: 265

教学笔记82-人鼠细胞融合的科学史实人教版必修一在细胞膜这一节提到了人鼠细胞融合的实验,教材本意是以这个实验证明细胞膜上的蛋白质可以发生运动,进而说明细胞膜具有流动性。 但教材上的配图(图1)却容易给大家造成一种误导:人鼠荧光标记蛋白的融合发生在细胞融合过程中! 我们先来看以下科学史: 1970年Frye与Edidin将离体培养的小鼠和人细胞融合在一起,形成人、鼠杂交细胞,然后利用间接免疫荧光法通过细胞表面抗原分布的变化来研究膜蛋白的侧向扩散,原理如图2所示。 他们首先将相应的抗体用荧光染料做标记:他们用发绿色荧光的荧光素对小鼠细胞表面抗原所对应的抗体进行标记,用发红色荧光的碱性蕊香红对人细胞表面抗原所对应的抗体进行标记;接着使用灭活的仙台病毒诱导两种细胞融合,在小鼠细胞与人细胞已经融合成为了一个新的杂交细胞时,将两种染料所标记的抗体与细胞膜表面相应的抗原结合,于是杂交细胞一半呈红色,一半呈绿色,说明此时人细胞与小鼠细胞表面被荧光标记的蛋白质都未发生流动,仅限于各自的细胞膜表面。 接着将杂交细胞在37℃下保温,10分钟后,可以观察到荧光标记在细胞表面发生扩散,40分钟后,已经无法分辨出杂交细胞表面的红色荧光区域与绿色荧光区域,说明此时不同标记的蛋白质已经扩散至均匀分布。 从以上过程,结合选修三动物细胞工程相关知识可知:在细胞已经融合完成之后才开始进行荧光标记蛋白的融合!这个实验也说明,细胞融合并非是荧光蛋白均匀分布的根本动力。



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