qEV 概述

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qEV 概述

2024-07-16 14:12| 来源: 网络整理| 查看: 265

在 SEC 色谱柱出现之前,超速离心 (UC) 被认为是浓缩和分离 EVs/外泌体的金标准。UC 耗时且无法提供一致的标准化样品。UC 操作中高达 200,000g 的超高离心力会影响、破坏和聚集囊泡,因此可能会使大部分研究失效。

此外,含 EVs/外泌体的离心沉淀物中存在聚集的蛋白质和核酸污染物。密度梯度离心 (DGC) 目的是提高 UC 分离法获得的EVs/外泌体的纯度,但同时它也使分离程序复杂化和使分离时间延长,而且还降低了 EVs/外泌体的产量。UC 或 DGC 都无法实现不同实验室间的标准化采样。沉淀试剂盒已被用于EVs/外泌体纯化。这些试剂盒通常为 PEG 基聚合物,可沉淀多种产物,而不仅仅是 EVs/外泌体。已发表的独立数据表明,这些沉淀产物中含有大量的非 EVs 材料污染物,因为上述沉淀试剂可导致与蛋白质、脂蛋白和其它生物成分形成共沉淀。qEV SEC 色谱柱可提供高纯度的样品而不会影响 EVs/外泌体 的结构或功能。沉淀试剂盒提供的是不纯净的样品而且不同批次间也存在差异。EV 领域的先锋研究人员已不再使用或推荐沉淀方法。



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