使用说明丨胶原酶,冻干粉特性研究

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使用说明丨胶原酶,冻干粉特性研究

2024-07-06 03:43| 来源: 网络整理| 查看: 265

胶原酶由多种酶组成,包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶,旨在有效水解胶原蛋白和解离组织。已经评估了各种胶原酶产品专门用于 Advanced BioMatrix 的胶原蛋白产品。该产品用于提高消化胶原凝胶中分离细胞的活力和功能。胶原酶以 50 mg 包装大小的冻干无菌粉末形式提供。重构后,产品即可使用。

 

艾美捷胶原酶,冻干粉,50 毫克#ABM-5030-50MG特性:

来源:来自Clostridium histolyticum

形式:冻干粉末

酶活性:单位干重 > 125 U/mg,酪蛋白酶 > 200 U/mg,肉毒杆菌蛋白酶 < 4 U/mg,胰蛋白酶 < 0.5 U/mg

胶原酶单位定义:1单位在37°C、pH 7.5条件下,在5小时内从胶原中释放出一个微摩尔的L-亮氨酸当量

包装大小:50毫克

灭菌:0.22微米过滤

无菌性:无生长

存储:建议将胶原酶冻干粉末存储在2-10°C。重新溶解后,产品在2到10°C稳定,可保存长达5天。

 

胶原酶作为胶原凝胶的解离试剂提供。各种胶原酶产品已经专门评估用于与Advanced BioMatrix的胶原产品一起使用。该产品旨在提高从胶原凝胶中分离的细胞的存活能力和功能性。

胶原酶以50毫克包装大小的冻干、无菌粉末形式提供。重新溶解后,产品即可使用。

胶原酶作为供应的产品不适用于人体使用

 

胶原酶,冻干粉使用说明:

使用这些建议作为指导来确定适合您的培养系统的合适凝胶解离程序。

在磷酸盐缓冲盐水或其他 pH 中性介质中重构冻干胶原酶粉末(50 毫克)。可以使用 1 mg/ml 的典型浓度。

从胶原凝胶中吸出培养基。

用预热的 PBS 或其他 pH 中性培养基清洗胶原凝胶 2X,以去除可能抑制胶原降解的培养基。

加入适量的胶原酶溶液(一个凝胶体积就足够了)。例如:对于含有 0.5 ml 凝胶的 24 孔板,添加 0.5 ml 胶原酶溶液。

转移到 37ºC 培养箱中 30-60 分钟。为了促进胶原凝胶的更快解离,凝胶和胶原酶溶液可以使用大口径移液器吸头上下移液。

如有必要,在 37°C 下再孵育 30-60 分钟,以完成凝胶的消化。如果需要,每 15 分钟移取一次凝胶/细胞混合物。注意:较厚的凝胶或含有较高浓度细胞的凝胶可能需要更多时间。

凝胶*消化后,向凝胶/细胞混合物中加入等体积的*培养基,然后收集细胞。

冲洗收集任何残留细胞的培养容器。

在室温下以 250 xg 离心细胞悬液 5 分钟。

小心吸出上清液,将细胞沉淀重悬于 0.5 -1 ml 新鲜培养基中。

使用血细胞计数器和台盼蓝确定细胞计数和活力。

 

艾美捷科技是Advanced BioMatrix的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。



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