聚乙二醇(PEG)浓缩法及超过滤法纯化病毒实验

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聚乙二醇(PEG)浓缩法及超过滤法纯化病毒实验

2024-07-11 19:42| 来源: 网络整理| 查看: 265

实验方法原理 这一方法是浓缩大量病毒悬液和初步纯化病毒的常用方法之一。 PEG 是环氧乙烷和水缩合而成的水溶性非离子型聚合物,相对分子质量为 2 000-6 000 的 PEG 多用于浓缩病毒,其中以 PEG6 000 效果最好。 PEG 浓缩法能成百倍的浓缩病毒,而且对病毒的结构和抗原性有保护作用。实验材料 待纯化的病毒试剂、试剂盒 聚乙二醇仪器、耗材 烧杯透析袋(可选)实验步骤 操作方法有以下三种。1. 直接加入法 当只有少量的病毒悬液时采用此法。在病毒悬液中加入 8%~10% 的PEG搅匀使病毒沉淀。此法须以密度梯度离心法去除病毒沉淀物中的 PEG 。2. 液体浓缩法 ①用超声波或冻融的方法使细胞破碎释放病毒,3 000 r/min 离心 30 min,除去细胞碎片;②缓慢搅动并加入 NaCl , 使最终浓度为 0. 5mol/L NaCl , 再加人等量的 PEG,4℃......阅读全文



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