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电泳问答

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电泳主要利用聚丙烯酰胺的分子筛效应分离蛋白质和

核酸，

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蛋白质电泳分析可从蛋白质亚基分子量的大小就分离

蛋白质。

几乎所有蛋白质电泳分析都在聚丙烯酰胺凝胶上进行，而所有条

件总要确保蛋白质解离成单个多肽亚基并进可能减少其相互间的聚集，

最常用的就是

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电泳技术，关于大家在此过程中经常遇到的

问题进行一些讨论：

Q

：

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电泳的基本原理

? 

A

：

SDS-

聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进

SDS(

十二烷基硫酸钠

)

，

SDS

会与变性的多肽，并使蛋白带负电荷，由

于多肽结合

SDS

的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关，

因此

SDS

多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小

有关，在达到饱和的状态下，每克多肽可与

1.4g

去污剂结合。当分子

量在

15KD

到

200KD

之间时，蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性

关系，符合下式：

logMW=K-bX

，式中：

MW

为分子量，

X

为迁移率，

k

、

b

均为常数，若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数

作图，可获得一条标准曲线，未知蛋白质在相同条件下进行电泳，根

据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。

Q

：配胶缓冲液系统对电泳的影响

?