小伙伴们在培养细胞时，经常会遇到passage number 和 population doubling number。这两个数值到底什么区别呢？

Passage number是什么意思？

细胞培养中的传代数（passage number）是记录该细胞被传代的次数，即收取并重新分散到多个“子”细胞培养瓶中。

“刚复苏的细胞是否为新的一代呢？”这是一个经常被问到的问题。当细胞被胰酶消化、冻存，随后解冻并重新复苏时，这个过程为一代。因此，将细胞转移到另一个培养瓶，在重新播种时应增加其传代数，但在冻存时不要增加传代数。

Population doubling number是什么意思？

倍增次数（population doubling (PD or pd) number）是细胞种群数量翻倍的近似数。这对于寿命有限的细胞系更有意义。例如，当传代的细胞分裂比例为1:2时，传代数与PD数相等；传代的细胞分裂比例为1:4时，传代数等于2 PDs，以此类推。

为什么passage number只被认为是一个参考值?

传代数没有考虑细胞的播种密度或随后收获的细胞数量，因此无法给出种群数量翻倍的实际数字。例如，一个人可以将代次为10的细胞按1:4进行传代，而另一个可以按1:10的比例传代相同的细胞。两者在新的培养瓶都标上相同的代次数，即11。然而，分裂率较高的细胞将经历更多轮的细胞分裂，它们与初始细胞间隔了很多代。

没有直接的实验来确定细胞培养的传代数或PD数。因此，每次传代都必须有适当的记录。

倍增次数的意义是什么？

在细胞培养中，PD数可以反应增殖的程度。原代细胞的寿命是有限的，经过一定程度的细胞分裂后细胞会衰老(停止分裂)，而一些连续的细胞系将无限增殖。

PD数通常用于有限寿命的细胞培养，而传代数通常用于连续细胞系培养。

由于培养环境中的选择性压力，以及遗传不稳定性，所有细胞的特性都可能随时间而变化。特别是对于连续的细胞系，细胞可以连续增殖，但随着传代数的增加，它们的表型和基因型可能会改变。

原代细胞特性与原始组织的细胞最为相近。传代培养时，细胞的寿命是有限的，而且随着传代次数的增加，它们为适应体外培养环境，细胞特性会更容易发生显著变化，所以应该仔细记录细胞的倍增次数。相比之下，一个连续的细胞系，例如，来自人类癌症的细胞系，可以无限次传代。经过长期传代后，10代以上的细胞表型差异可能远小于原代细胞前10代的表型差异。

细胞能培养多少代？

对于大多数细胞，它们所能经历的传代次数的限制尚未确定。来源于原代细胞的有限寿命的细胞系在经历一定次数的倍增后会衰老(例如，正常人的成纤维细胞，大约是60个PD)。连续的细胞有无限的使用寿命，虽然细胞可能持续增殖一段时间，但随着时间的推移，它们的表型和基因型会发生改变。

有限寿命的细胞系可能失去它们特有的表型，连续的细胞系可能产生相当大的遗传不稳定性和表型异质性。因此，建议研究人员定期监测细胞特征，以确保细胞保持实验的适用性。