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本试剂盒可测各种动物组织、植物组织等样本中铁的含量。 在酸性溶液和还原剂的作用下，使运铁蛋白中铁与蛋白分离，使组织中的高铁还原成亚铁，后者与双吡啶结合成粉红色的络合物，在一定范围内，铁离子的多少与呈色深浅成正比关系。 铁有70%左右存在于血红蛋白中，是血红蛋白和肌红蛋白的重要原料，铁进入血浆后以转铁蛋白形式向细胞内运输铁，而且将具有毒性作用的游离铁转变为对细胞无害的结合铁。 快速简便：全程约2小时，可测50例左右样本。稳定性好：试剂盒4℃保存3个月。再现性好：变异系数CV=1.5%。回收试验：X =100%。受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。测试面广：可测各种动物血清(浆)、组织，效果均佳。组分规格铁显色剂2号甲粉1支2号乙粉1支2号丙液100mL100mg/L铁标准贮备液1mL保存：4℃，有效期3个月。铁显色剂的配制：使用时将2号甲粉、2号乙粉倒入l00mL 2号丙液中，充分混匀，溶解完全，即为铁显色剂，4℃避光保存。2mg/L铁标准应用液的配制：取铁标准贮备液0.2mL加双蒸水定溶至10mL，4℃保存。玻璃器材需严格清洗，避免铁的污染，建议最好用一次性塑料试管。若上清浑浊，可再用另一试管再次离心后比色。本法测定效果好，干扰因素少，适用于多种组织匀浆的测定。样本前处理：动物组织的样本前处理：准确称取待测动物组织的重量，按重量(g):体积(ml)=l:9的比例，加入9倍体积的生理盐水，冰水浴条件机械匀浆，2500转/分，离心10分钟，取上清液待测。植物组织的样本前处理：准确称取待测植物组织的重量，按重量(g):体积(ml)=1:9的比例，加入9倍体积的匀浆介质(匀浆介质推荐使用0.1mol/L pH7～7.4磷酸盐缓冲液)，冰水浴条件下机械匀浆，3500转/分，离心10分钟，取上清液待测。操作表：空白管标准管测定管双蒸水(ml)0.52mg/L铁标准应用液(ml)0.5待测样本(ml)0.5铁显色剂(ml)1.51.51.5混匀后，沸水浴5分钟，流水冷却，3500转/分钟，离心10分钟，取上清液1.0mL，0.5cm光径，波长520nm，双蒸水调零，测各管吸光度0D值。计算公式：组织铁含量(mg/gprot)＝测定OD值－空白OD值×标准品浓度(2mg/L)÷待测样本蛋白浓度(gprot/L)标准OD值－空白OD值组织铁含量(μmol/gprot)＝测定OD值－空白OD值×标准品浓度(35.81μmol/L)÷待测样本蛋白浓度(gprot/L)标准OD值－空白OD值注：标准管铁含量为2000μg/L，铁原子量为55.847，所以标准管铁含量为35.81μmol/L计算举例：例1：取10%的小鼠肝脏组织匀浆0.5mL按操作表进行组织铁测定，在520nm处，0.5cm光径，测得各管吸光度为：空白管0.002，标准管0.064，测定管0.235，同时测得10%小鼠肝匀浆蛋白浓度为13.1365gprot/L，则计算如下：组织铁含量(μmol/gprot)＝测定OD值－空白OD值×标准品浓度(35.81μmol/L)÷待测样本蛋白浓度(gprot/L)标准OD值－空白OD值＝0.235－0.002×35.81÷13.1365=10.3324(μmol/gprot)0.064－0.002例2：取10%的小鼠肾组织匀浆0.5mL按操作表进行组织铁测定，在520nm处，0.5cm光径，测得各管吸光度为：空白管0.002，标准管0.064，测定管0.079，同时测得10%小鼠肾匀浆蛋白浓度为10.5776gprot/L，则计算如下：组织铁含量(μmol/gprot)＝测定OD值－空白OD值×标准品浓度(35.81μmol/L)÷待测样本蛋白浓度(gprot/L)标准OD值－空白OD值＝0.079－0.002×35.81÷10.5776=4.2045(μmol/gprot)0.064－0.002例3：取10%的小鼠心肌组织匀浆0.5mL按操作表进行组织铁测定，在520nm处，0.5cm光径，测得各管吸光度为：空白管0.002，标准管0.064，测定管0.078，同时测得10%小鼠心肌匀浆蛋白浓度为6.6536gprot/L，则计算如下：组织铁含量(μmol/gprot)＝测定OD值－空白OD值×标准品浓度(35.81μmol/L)÷待测样本蛋白浓度(gprot/L)标准OD值－空白OD值＝0.078－0.002×35.81÷6.6536=6.5974(μmol/gprot)0.064－0.002例4：取10%的小鼠肺组织匀浆0.5mL按操作表进行组织铁测定，在520nm处，0.5cm光径，测得各管吸光度为：空白管0.002，标准管0.064，测定管0.094，同时测得10%小鼠肺匀浆蛋白浓度为7.1655gprot/L，则计算如下：组织铁含量(μmol/gprot)＝测定OD值－空白OD值×标准品浓度(35.81μmol/L)÷待测样本蛋白浓度(gprot/L)标准OD值－空白OD值＝0.094－0.002×35.81÷7.1655=7.4157(μmol/gprot)0.064－0.002例5：取10%的小鼠脑组织匀浆0.5mL按操作表进行组织铁测定，在520nm处，0.5cm光径，测得各管吸光度为：空白管0.002，标准管0.064，测定管0.040，同时测得10%小鼠脑匀浆蛋白浓度为4.4358gprot/L，则计算如下：组织铁含量(μmol/gprot)＝测定OD值－空白OD值×标准品浓度(35.81μmol/L)÷待测样本蛋白浓度(gprot/L)标准OD值－空白OD值＝0.040－0.002×35.81÷4.4358=4.9479(μmol/gprot)0.064－0.002例6：取5%的菠菜叶片组织匀浆0.5mL按操作表进行组织铁测定，在520nm处，0.5cm光径，测得各管吸光度为：空白管0.002，标准管0.064，测定管0.053，同时测得5%菠菜叶片匀浆蛋白浓度为1.6378gprot/L，则计算如下：组织铁含量(μmol/gprot)＝测定OD值－空白OD值×标准品浓度(35.81μmol/L)÷待测样本蛋白浓度(gprot/L)标准OD值－空白OD值＝0.053－0.002×35.81÷1.6378=17.9855(μmol/gprot)0.064－0.002相关搜索：组织中的铁含量测定试剂盒(比色法)，组织铁，tissue iron assay kit
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