磷是动物体必需的矿物元素之一。由于植物性饲粮中磷主要以植酸磷形式存在，而植酸磷对于猪、鸡等非反刍动物来说难以消化利用[1-4]，因此，在饲粮中补充一定量的外源磷是弥补动物体磷需要的主要途径。不同磷源因化学组成、性质及磷与其它元素比例不同，而存在消化、吸收与利用效率差异[5-6]。作为饲料生产中常规添加磷源(占添加磷的90%以上)，磷酸氢钙(DCP)使用量大，但其价格不断上涨，使得DCP成为继蛋白、能量后在饲粮成本中占比较大的原料[7]。同时，DCP属于枸溶性磷源，难溶于水，动物对其有效成分吸收利用率较低，造成向外界环境中磷排泄量加大[8]。因此，开发添加量低、生物学效价高及价格相对低廉的磷源成为当前磷营养研究的热点[9]。磷酸二氢钙(MCP)是美国饲料企业常用的矿物磷源，目前在我国部分鱼类饲料生产中已被应用[10]。国外对MCP的大量研究认为，MCP中的磷比DCP中的磷更易吸收利用[11-13]。磷酸一二钙(MDCP)是MCP与DCP的共结晶结合物，是一种水溶性磷酸盐与枸溶性磷酸盐相结合的新型饲料添加剂[14]。植源性磷酸氢钙(PDCP)是由肌醇工业生产中的下脚料肌醇渣经过酸解、生石灰中和及沉淀等过程获得的饲料级磷酸氢钙[15]。目前，MCP、MDCP和PDCP作为饲料磷源在我国尚未得到广泛应用，有待进一步的开展研究工作。

蛋鸡是我国主要的养殖畜禽种之一，年养殖量14亿只左右。蛋鸡因肠道细短而易造成饲粮养分利用率低，粪便养分浓度高，再加上我国饲养量大，蛋鸡氮、磷等排泄污染问题不容小觑。产蛋鸡因蛋壳合成需要，对钙、磷的需求有较大差异，饲粮钙含量较高，磷含量低，钙磷比例远远高于非产蛋家禽。这就要求饲粮有效态磷含量只有维持在更为精确的水平下才能有利于钙、磷的吸收利用，因此，蛋鸡饲粮中磷源及磷水平的改变，可能对钙吸收与利用的影响更为敏感[16]。此外，磷广泛参与蛋白质和核酸等含氮物质的代谢[17]，饲料磷源及磷水平的改变有可能会影响氮的利用效率，进而影响氮排泄。目前，关于磷水平对动物钙、磷排泄的影响已有相关研究，且多集中于生长型动物，对蛋鸡的研究较少，有关磷源的研究多集中于对动物生产性能、畜产品品质的影响，对钙、磷排泄的影响研究较少，而综合研究磷源、磷水平、磷源与磷水平交互对蛋鸡钙、磷、氮排泄的影响尚未见报道。

本试验选用DCP、MCP、MDCP和PDCP 4种磷源，参照NRC(1994)推荐量设计低磷和正常磷两个磷添加水平，研究磷源与磷水平对蛋鸡生产性能及钙、磷、氮代谢的影响。

DCP购自龙蟒集团，磷含量17.1%，钙含量19.3%；MDCP购自鑫森源化工有限公司，磷含量21%，钙含量16.1%；MCP购自琳胜化工有限公司，磷含量22.3%，钙含量13.1%；PDCP购自吉林海资生物工程技术有限公司，磷含量20.73%，钙含量28.72%。

试验将4个磷源分别按照0.1%和0.2%水平添加到基础饲粮中，共计8个处理组，分别为0.1%磷添加水平的DCP、MDCP、MCP、PDCP组和0.2%磷添加水平的DCP、MDCP、MCP和PDCP组，每个处理6个重复，每个重复10只鸡。预试期1周，试验期20周。

选用健康、产蛋性能接近的53周龄海兰褐蛋鸡480只，随机分为8组，采用三层阶梯笼养，每笼2只鸡，自由采食与饮水，按照饲养管理程序定期进行防疫和饮水消毒。采用16 h(5:30-21:30)光照，早上8:00和下午16:00各喂料1次，每天人工匀料1次。

参照NRC(1994)标准和海兰褐商品蛋鸡2015年标准(海兰网：http://www.hylinechina.com/)，以玉米、豆粕、菜籽粕、麸皮等为主要原料配制基础饲粮(表 1)。按照0.1%和0.2%的水平分别将DCP、MCP、MDCP和PDCP添加入基础饲粮，制成4种磷源的低磷水平试验饲粮和高磷水平试验饲粮。磷添加水平与含量见表 2。

每周以重复为单位记录产蛋数、蛋重和耗料量，并计算平均产蛋率、平均产蛋量和料蛋比。

于试验第10和20周周末前1 d，各组禁止采食，并于第2天每重复随机取1只鸡，每组共6只鸡，翅静脉处采集血液。血液于-4 ℃静置30 min后，于4 000 r·min-1离心5 min，获得血清。血清钙、磷含量测定采用Roche Modular P全自动生化分析仪，Roche配套试剂，使用MTB比色法测定钙含量，使用磷钼酸紫外法测定磷含量，指标校准使用Roche标准品。

每5周的最后1周采用全收粪法收集各组粪便，拣出脱落的羽毛和皮屑，置托盘上摊匀，于70 ℃恒温干燥箱内烘至恒重。采用四分法从烘干粪样中取样50 g，用研磨磨碎，过60目筛，置于封口袋中，干燥处保存。

采用薛颖等[18]报道的方法对饲料和粪便样品进行湿法消化。氮含量测定参照GB/T6432-1994进行；磷含量测定参照GB/T6437-1992进行；钙含量测定参照GB/T6436-2002进行。

使用Excel软件进行原始数据的处理，试验结果用“平均数±标准差”表示；利用SPSS20.0软件的General Linear Model(GLM)模块进行单变量多因素方差分析，用LSD模块进行差异显著性检验。

由表 3可知，磷源对蛋鸡平均产蛋率无显著影响(P>0.05)，全期来看，PDCP组平均产蛋率最高，其次为MDCP，DCP组平均产蛋率最低；与0.1%磷水平相比，0.2%磷水平组蛋鸡平均产蛋率有增加趋势，全期产蛋率提高3.69%(P=0.088)；磷源与磷水平交互作用对蛋鸡平均产蛋率无显著影响(P>0.05)。

由表 4可知，磷源对蛋鸡平均产蛋量无显著影响(P>0.05)，整个试验期来看，PDCP组蛋鸡平均产蛋量最高，依次为MDCP、MCP和DCP组；与0.1%磷水平组相比，0.2%组试验各阶段(P < 0.130)和全期(P=0.104)平均产蛋量均有不同程度的增加趋势；磷源与磷水平交互作用对蛋鸡平均产蛋量无显著影响(P>0.05)。

由表 5可知，磷源对蛋鸡料蛋比无显著影响(P>0.05)，试验各阶段和全期均表现为PDCP组料蛋比最低，DCP组最高；与0.1%磷水平组相比，0.2%磷水平组试验各阶段(P < 0.120)和全期(P=0.106)料蛋比均有不同程度降低趋势；磷源与磷水平交互作用对蛋鸡料蛋比无显著影响(P>0.05)。

磷源与磷水平对蛋鸡血清钙和磷含量的影响见表 6。结果可知，磷源对蛋鸡血清钙和磷含量无显著影响(P>0.05)，血清钙和磷含量均为MDCP组含量最高，血清钙含量DCP组最低，血清磷含量MCP组最低；与0.1%磷水平相比，0.2%水平组血清钙和磷含量均无显著差异(P>0.05)，但血清磷含量不同程度增加；磷源与磷水平交互对蛋鸡血清钙和磷含量无显著影响(P>0.05)。

由表 7可知，磷源对蛋鸡钙代谢有显著影响(P < 0.05)，DCP组钙排泄最高，MCP组次之，DCP组显著高于PDCP组(P < 0.05)，1~5周时，DCP组钙排泄显著高于MDCP组(P < 0.05)，其它试验阶段两组无显著差异(P < 0.05)，4种磷源组钙排泄随着试验时间延长呈现逐渐增加趋势，以MCP组增幅最大(P>0.05)；磷水平对蛋鸡钙排泄有极显著影响(P < 0.01)，与0.1%磷水平相比，0.2%水平组各试验阶段及全期钙排泄均极显著降低(P < 0.01)；磷源与磷水平交互作用对蛋鸡11~15、16~20和1~20周钙排泄影响显著(P < 0.05)。

由表 8可知，磷源对蛋鸡磷排泄有极显著影响(P < 0.01)，其中DCP组蛋鸡磷排泄最高，显著高于MDCP(P < 0.05)、MCP(P < 0.05)和PDCP(P < 0.01)，MCP组磷排泄显著高于PDCP组(P < 0.05)，但与MDCP组无显著差异(P>0.05)，随着试验时间延长，4种磷源组磷排泄呈逐渐增加趋势，以DCP组增加最多(P>0.05)；与0.1%磷水平相比，0.2%水平组磷排泄极显著增加(P < 0.01)，同一磷水平下，随试验时间延长磷排泄呈逐渐增加趋势(P>0.05)；磷源与磷水平交互作用对蛋鸡磷排泄影响极显著(P < 0.01)。

由表 9可知，磷源对蛋鸡氮代谢没有显著影响(P>0.05)，分析表明，DCP组蛋鸡氮排泄量最大，其次为MCP、MDCP和PDCP；与0.1%磷水平相比，0.2%磷添加组蛋鸡氮排泄量减少，1~20周全期氮排泄减少3.88%；磷源与磷水平交互作用对氮排泄无显著影响(P>0.05)。

一直以来，DCP是动物饲养中最常用的磷源种类，但作为枸溶性磷源，DCP生物学效价低，污染大，再加上近年来DCP价格不断上扬，使得替代DCP的呼声渐高。本试验选用3种新型磷源与DCP的对比结果表明，磷源对蛋鸡生产性能无显著影响，但磷源间仍表现出一定差异，表现为PDCP组蛋鸡平均产蛋率和平均产蛋量均不同程度高于其他磷源，料蛋比不同程度低于其他磷源，依次为MDCP、MCP和DCP。陈晓春等[19]以磷酸二氢钾(MPP)为标准物研究MCP、MDCP和DCP 3种磷源对蛋鸡生产性能的影响表明，DCP组蛋鸡产蛋率最高，其次为MDCP、MCP和MPP，平均产蛋量为MDCP组最高，其次为DCP、MCP和MPP，但其相对生物学价值(RBV)均为MDCP最高，DCP次之，MPP最低。谭占坤等[9]研究MDCP和DCP对蛋鸡生产性能的影响表明，两种磷源在蛋鸡平均产蛋率、平均蛋重、平均产蛋量和料蛋比方面相同，但MDCP组蛋鸡采食量不同程度高于DCP组。张秀峰[20]研究PDCP和DCP对蛋鸡生产性能的影响表明，PDCP组蛋鸡平均产蛋率高于DCP组，但差异不显著。从本试验和早期的研究结果来看，磷源的改变对蛋鸡生产性能不会产生显著影响，但在实际生产中生产性能的小幅增加或磷源成本的适当降低，都具有十分重要的现实意义。就本试验所观测的蛋鸡生产性能指标而言，磷源PDCP、MDCP和MCP均不同程度优于DCP。

饲粮中含有一定量的有效磷(NPP)是蛋鸡保持较高生产性能的前提。NRC(1994)标准规定产蛋鸡饲粮NPP含量为0.25%，中国鸡饲养标准(NY/T33-2004)规定高峰期和产蛋后期蛋鸡饲料NPP均为0.32%。谭占坤等[9]研究表明，饲料NPP含量为0.22%~0.42%时，对蛋鸡平均产蛋率、平均产蛋量和料蛋比无显著影响，但NPP含量超过0.32%后，随着NPP水平增加蛋鸡平均蛋重呈下降趋势，当NPP含量为0.42%时平均蛋重显著降低。当饲粮NPP含量低于0.15%时即会对蛋鸡产生不利影响[21-22]。本试验结果表明，在NPP含量为0.14%的基础饲粮中添加0.1%或0.2%的NPP，使日粮NPP含量达到0.24%~0.34%时，对蛋鸡产蛋率、产蛋量和料蛋比不会产生显著影响。但与0.1%磷添加组相比，0.2%组蛋鸡产蛋率(P < 0.1)和平均产蛋量(P≤0.12)呈增加趋势，料蛋比(P≤0.11)有减少趋势，但两组间无显著差异。这与早期的研究结果一致[9, 19, 22-23]。

动物体血液中保持一定的钙、磷含量是其维持生命、生长、生产和繁殖的重要前提。血液中的钙几乎全部存在于血浆中，并以离子与蛋白质或与其他物质结合的形式存在，其中离子态钙占50%左右。血液中磷主要以H2PO4-1的形式存在于血细胞中，仅有1/5~1/10的磷存在于血浆中。健康的动物体内血清钙、磷含量较为恒定，即便短期内饲用低钙或磷日粮，动物体仍可通过调用机体沉积的钙、磷来保存血清钙磷的稳定性[16]。但在动物不同生理阶段、饲用低钙或磷日粮超过一定时期及免疫应激等情况下，血清钙、磷含量会发生一定的变化[24-26]。本研究表明，DCP、MDCP、MCP和PDCP 4种磷源对蛋鸡血清钙、磷含量无显著影响，这与廖阳慈等[27]研究结果一致。但与常规饲用磷源DCP相比，MDCP和PDCP磷源组蛋鸡血清钙、磷含量不同程度升高，这说明，MDCP和PDCP磷源的利用效率高于常规磷源DCP。此外，本试验表明，磷水平、磷源与磷水平交互对蛋鸡血清钙、磷也无显著影响。而朱元招等[24]研究认为，与高磷添加植酸酶日粮相比，低磷添加植酸酶、低磷不加植酸酶日粮组蛋鸡血清磷呈显著降低，血清钙也呈一定的降低趋势，这与本研究结果不一致。但在本研究中，0.1%磷添加组蛋鸡血清钙、磷均随试验时间延长呈下降趋势，而0.2%磷添加组呈升高趋势，尤其是血清磷水平变化较大。这一结果表明，长时间低磷水平饲喂会造成蛋鸡体内磷代谢紊乱，并随着自身沉积磷的消耗，而出现血清磷水平的下降。

本研究表明，磷源、磷水平及磷源与磷水平交互作用对蛋鸡钙和磷排泄量影响显著。蛋鸡钙排泄量从大到小依次为DCP、MCP、MDCP和PDCP，其中DCP和MCP显著高于PDCP，MDCP与其他磷源无显著差异；磷添加水平从0.1%到0.2%，蛋鸡钙排泄呈极显著降低趋势，且磷源与磷水平交互作用对钙排泄影响显著。在磷排泄方面，DCP极显著高于MDCP和PDCP，显著高于MCP，MCP显著高于PDCP；磷添加水平从0.1%到0.2%，磷排泄量呈极显著增加趋势，且磷源与磷水平交互作用极显著影响蛋鸡的磷排泄。以上结果表明，不同磷源在动物消化道内的利用率存在差异，不仅直接影响磷的利用，对钙的吸收利用也有较大影响，且这种效应与添加水平间存在密切相关。廖阳慈等[27]研究表明，与DCP相比，PDCP能够提高肉鸡的钙、磷利用率，促进钙在体内的沉积，降低钙排泄。吴超等[28]对蛋鸡的研究表明，PDCP较DCP极显著提高了钙和磷的表观代谢率。G.De Groote等[29]以趾骨灰分为指标研究发现，MCP的相对生物学效价高于DCP。H.M.Edwards等[30]以胫骨灰分为指标也发现MCP相对生物学效价高于DCP。P.E.Waibel等[31]以胫骨软骨发育不良(TD)为评价指标研究高磷低钙饲粮下DCP与MDCP的干预效果，结果表明，MDCP较DCP缓解了肉鸡TD的发生，并推测其与MDCP的磷利用率高于DCP有关。涂广运等[32]研究福美双诱导下DCP和MDCP对肉鸡TD和钙磷代谢的影响表明，相对于DCP，MDCP有降低TD评分的作用，同时显著提高了胫骨灰分、钙和磷的含量。磷水平对钙、磷的代谢影响表明，饲粮磷水平对陕北白绒山羊断奶羔羊和水貂粪钙、粪磷含量及钙、磷消化率有极显著影响，随着磷水平增加，粪钙、粪磷量显著增加[33-34]。王庆云等[35]以正常磷水平为对照，试验组依次降低磷水平为75%、50%、25%和0%，结果发现，随着饲粮磷水平的降低钙、磷利用率呈升高趋势，同时粪钙、磷排泄呈下降趋势。以上结果从不同方面均证明了磷源及磷水平对钙、磷利用率及钙、磷代谢存在影响，与本试验结果一致，此外，本试验还证明磷源与磷水平交互作用对蛋鸡钙排泄有显著影响，对磷排泄有极显著影响。

磷在动物体内参与蛋白质、核酸等含氮物质代谢，因此，磷缺乏或过量可能会影响氮在动物体内的新陈代谢过程[17]，进而影响氮的利用与排泄。A.J.Mudd等[36]认为，饲粮磷水平对氮沉积作用的影响大于饲粮钙水平对其的作用。刘帅等[34]对水貂的研究表明，随着饲粮磷水平增加，氮利用率提高，粪氮排出降低，但差异不显著。雷乔波[37]对蛋鸡的研究表明，饲粮磷水平降低显著降低氮的利用率。本试验结果表明，0.1%添加水平与0.2%水平无显著差异，但氮排泄与磷水平呈现一定负相关，即随着磷水平增加，氮排泄减少。在磷源对氮代谢的影响方面，本试验表明，磷源对蛋鸡氮代谢影响不显著，DCP组氮排泄量最高，其次为MCP、MDCP和PDCP。这一结果可能与4种磷源对蛋鸡生产性能的影响有关，从而间接影响氮利用，但目前关于磷源对蛋鸡氮代谢的影响尚未见报道。此外，本试验中磷源与磷水平在蛋鸡氮代谢上未显示出显著互作效应。

日粮中含有0.24%~0.34%的NPP能够满足蛋鸡生产性能的需要，随着NPP增加，钙排泄显著降低，磷排泄显著增加。

PDCP、MDCP和MCP可替代常规磷源DCP，其中PDCP和MDCP在促进蛋鸡生产性能、降低钙、磷、氮排泄方面的效果较好。