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作者：

巩柯

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摘要：

目前,以猪皮为原料制备胶原基质敷料用于皮肤损伤修复已成为研究热点.但传统方法制得的脱细胞真皮基质(ADM)存在渗透性差,抗菌性能低,生物相容性差等缺点,这严重限制了脱细胞真皮基质敷料在临床的广泛应用. 针对上述不足,本论文结合临床对创面敷料的要求以及猪皮的结构特点,以组织工程原理为指导,在前期实验室研究和目前最新研究成果基础上,采用新的工艺处理盐腌猪皮,彻底去除毛根鞘等纤维间质,提高胶原基质渗透性,复合羧甲基壳聚糖和硫酸软骨素等天然多糖,并用戊二醛交联,改善敷料的抗菌性能和生物活性,得到高性能脱细胞真皮基质抗菌敷料.本文的重点研究内容和结果如下: (1)首先对脱细胞真皮基质制备工艺进行研究,研究表明:经角蛋白酶处理得到的脱细胞真皮基质的透水汽性能和孔隙率要优于传统方法制得的基质的性能,因此,在脱细胞真皮基质的制备过程中,要增加角蛋白酶处理,具体工艺路线为: 盐腌猪皮→浸水→脱脂→碱膨胀→消除碱膨胀→角蛋白酶处理→二次酶处理→PBS液清洗→封装 (2)角蛋白酶用量对脱细胞真皮基质的透水汽性能,孔隙率和拉伸强度有一定影响:随着角蛋白酶用量的增加,基质的透水汽性能,孔隙率不断提高,拉伸强度有所降低,但降低幅度不大,能够在一定程度上维持胶原纤维结构的稳定,这表明角蛋白酶处理技术基本实现了改善脱细胞真皮基质透水气性能和渗透性的预期目的.从保证基质的机械性能和成本考虑,将角蛋白酶的用量定为0.3%. (3)在脱细胞真皮基质上复合羧甲基壳聚糖,研究羧甲基壳聚糖对基质抗菌性能的影响,为制备抗菌敷料提供可靠依据.抑菌实验结果表明:与常规基质相比,复合羧甲基壳聚糖后基质的抑菌率增加,这说明基质的抗菌性能得到一定程度改善,羧甲基壳聚糖对基质的抗菌性能有重要影响. (4)在脱细胞真皮基质上交联复合天然多糖,研究交联复合对基质拉伸强度,体外降解时间等理化性能的影响.实验结果表明:交联复合羧甲基壳聚糖,透明质酸,硫酸软骨素后,基质的拉伸强度,透水汽速率,体外降解时间和孔隙率增加. (5)根据以上(1),(2),(3),(4)的研究结果和组织工程学原理,结合敷料的性能要求,制备了高性能脱细胞真皮基质抗菌敷料,并对敷料的主要性能做相关检测.结果表明:经戊二醛交联后的敷料颜色微黄,毛孔可见,表面平细光滑,柔软有弹性,无肉眼可见杂物;扫描电镜观察显示:胶原纤维的网状结构疏松,多孔结构丰富,适合细胞增殖和血管化;拉伸强度为10.66MPa,约是纯胶原膜的5倍,拉伸强度较好,能够满足临床对敷料的要求.透水汽速率为3640g·m-2·24h-1左右,说明具有较好的透水汽性能;孔隙率为81.00%左右,适合创面恢复;体外降解时间为24.33h左右;pH值6.5-7.5,符合相关敷料标准;抑菌实验表明,敷料具有一定的抗菌性能,能有效减少创面感染. 本研究制备的高性能脱细胞真皮基质抗菌敷料渗透性好,具有一定的抗菌性能和生物活性,基本满足临床对敷料的要求,有望用于临床,促进创面愈合,为之后的应用研究奠定基础.

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关键词：

脱细胞真皮基质 敷料 制备 抗菌

学位级别：

硕士

学位年度：

2014

DOI：

10.7666/d.Y2597879

被引量：

7