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422

作者：

杨明琰

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摘要：

本文采用现代分离纯化技术从白芸豆中分离提取得到单一组分的α-淀粉酶抑制剂(α-AI)糖蛋白,对其生物学性质,超滤提取工艺,生物降糖,降脂活性及结构与功能之间的构效关系进行了系统的研究. 采用柱色谱分离技术从白芸豆中分离得到单一组分的α-AI,其为相对分子量为36000 Da的糖蛋白,对猪胰α-淀粉酶具有较高的抑制活性,抑制类型呈非竞争性抑制.白芸豆α-Al糖蛋白对温度,pH具有较高的稳定性. 白芸豆α-AI糖蛋白中蛋白质含量占88.2%,蛋白质中含有17种常见氨基酸,其中天冬氨酸,谷氨酸,丝氨酸和苏氨酸占有较高的比例;糖链中单糖组成为甘露糖,葡萄糖,半乳糖和木糖,其摩尔比为2.42:1.50:1.52:1.00,糖链中单糖残基以α-糖苷键连接.糖蛋白中蛋白质和糖链的连接方式为O-糖肽键.构效关系研究结果表明α-AI糖蛋白中单独的糖链和蛋白链都没有生物活性,只有糖链和蛋白链结合在一起形成完整的糖蛋白时,才对猪胰α-淀粉酶具有抑制活性. 分别采用有机膜超滤和无机膜超滤对白芸豆提取液中α-Al糖蛋白的浓缩提取工艺进行了对比研究.结果表明截留分子量为10000 Da的有机超滤膜更适合白芸豆中a-AI糖蛋白的分离浓缩.其最佳工艺条件为操作压力0.8 MPa,物料质量分数7%(1:15),物料温度35℃,物料pH为自然pH.在此条件下,其稳定膜通量为35.6 L/m2 h,体积浓缩倍数为8.3倍,多糖的截留率为20.1%,蛋白质的截留率为72.7%,活性物质收率为80.6%. 对白芸豆中α-AI的食用安全性和生物降糖,降脂活性进行了研究.结果表明α-AI无急性毒性;α-AI能显著降低四氧嘧啶糖尿病大鼠的空腹血糖,降低餐后血糖峰值,增加其淀粉耐量;α-AI能显著降低高血脂模型大鼠血清的TG,TC和LDL-C含量,升高HDL-C含量,具有调节高血脂模型大鼠血脂的功效.

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关键词：

白芸豆 组成结构 超滤提取工艺 生物活性 α-淀粉酶抑制 α-AI糖蛋白 柱色谱分离技术

学位级别：

博士

学位年度：

2008

DOI：

10.7666/d.y1253996

被引量：

5