蝴蝶兰(Phalaenopsis)是兰科植物中观赏价值最高、商品化最好的一个属，品种众多。为热带兰中珍品，享有“兰中皇后”的美誉(胡松华, 2003, 中国农业出版社, 56-68)，已成为世界第二大盆栽观赏植物(Chang et al., 2009)。 中小花型蝴蝶兰品种具叶挺美观、小巧新颖、花色丰富、花型多变、分枝性好、花量大、部分有香味、花期长等独特优点，精致包装成组合盆栽适宜办公室、家庭、商业空间布置，凸显其独特魅力与低碳、环保的理念，逐渐成为消费市场新宠，市场潜力巨大；是蝴蝶兰新品种培育的重要目标之一(李娜等, 2009)。 种质资源是培育优良品种的物质基础，明确不同种质间的遗传多样性与亲缘关系对育种以及种质遗传变异具有重要意义(Paterson et al., 1991)。目前，蝴蝶兰属种间与种内遗传变异在形态(李娜等, 2009; Christenson, 2001)、细胞(Lin et al., 2005; 庄东红等, 2007)和分子水平(明凤等, 2003; 赵谦等, 2008; 谢启鑫等, 2010; 李敏等, 2010; 张淑红等, 2009, 江苏农业科学, 2: 77-78)上已有一些研究，但研究多集中于大花型蝴蝶兰品种。利用形态学结合分子标记技术针对中小花型品种资源的评价、鉴定和研究基本处于空白。 序列相关扩增多态性(sequence related amplified polymorphism, SRAP)是一种新的DNA分子标记技术。具简单、可重复、高共显性、谱带易分离及分布均匀等优点，已在多种植物种质资源遗传亲缘关系分析、评价鉴定、杂交优势预测、遗传性状QTL标记、基因定位与克隆分析等领域广泛应用(Ferriol et al., 2003; 李莉等, 2006; 李媛媛等, 2007; 王建设等, 2007; 易杨杰等, 2008; 李梅等, 2009; 周艳霞等, 2009; 蹇黎和朱利泉, 2010)。 本研究以31个不同类型的中小花型蝴蝶兰种质为材料，利用传统形态学与SRAP分子标记技术比较分析其遗传多态性和亲缘关系，以期为中小花型蝴蝶兰优势杂交亲本选配、新品种选育和种质资源科学合理利用提供依据。 1结果与分析 1.1形态学聚类分析 以23个生物学指标为原始数据，标准化后采用欧氏距离、类平均法进行聚类分析，获得亲缘关系聚类树状图(图1)。根据遗传距离的远近将31个供试材料划分为4大类群。第Ⅰ类群包括Ph-R211、阿嬷、Ph-R216、Ph-R301、Ph-R312、Ph-R314、Ph-R303、Ph- R315、Ph-R305和Ph-R309共10个种质，表现为白色、米黄、浅粉红等浅色系花色，纸质花，花朵在4大类群中最小，典型的小花型种质。第Ⅱ类群共包括19个种质。其中萨拉黄金、Ph-R307、Ph-R210、Ph-R215和Ph-R219等5个种质聚为一个亚类，表现为黄色花瓣带斑点或斑块，花朵数少；满天红和Ph-R308聚为一个亚类；Ph-R212、Ph-R310、Ph-R311、Ph-R313、Ph-R316、Ph-R317和Ph-R318等7个种质聚为一个亚类，花瓣呈不同程度红色，具明显清晰网纹，分枝性好；Ph- R214、Ph-R218和兄弟女孩等3个种质聚为一个亚类，典型的中花型种质；Ph-R306和夕阳红均单独为一个亚类。种质Ph-R304单独为第Ⅲ类群，花瓣深紫红色带白边，花型奇特，唇瓣内凹成碗形、花瓣上有细小绒毛等。具香味、金黄色的种质小黄花单独为第Ⅳ类群。形态学聚类结果在一定程度上能把不同花色种质区分开来。  

图1 31份中小花型蝴蝶兰种质的形态数据聚类图

Figure 1 Dendrogram of 31 Phalaenopsis germplasm in Small and Medium Sizes based on morphological traits

表1 10对SRAP 引物组合的扩增情况

Table 1 Amplification results of SRAP primers for 31 phalaenopsis in small and medium sizes 

图2 31个中小花型蝴蝶兰种质的SRAP指纹图谱

Figure 2 The genomic SRAP fingerprints of 31 phalaenopsis germplasm in small and medium sizes

图3 31份中小花型蝴蝶兰种质的SRAP遗传聚类图

Figure 3 Dendrogram of 31 Phalaenopsis germplasm in small and medium sizes constructed using UPGMA based on SRAP markers

图4 试验材料

Figure 4 Testing Materials