养猫笔记:细说医院检查猫传腹的几种方法

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养猫笔记:细说医院检查猫传腹的几种方法

2024-07-16 02:04| 来源: 网络整理| 查看: 265

由于缺乏特定的临床症状以及典型的生化和病理异常,常规检测方法的敏感性和特异性又较低,明确诊断FIP是十分困难的。因此必须根据病史、临床症状、实验室诊断、影像学检查和组织病理学检查等方法,并且排除其他疾病后,对其进行综合诊断。若有体腔渗出液的存在,则通过渗出液的分析可以帮助对FIP的诊断。

👉👉1 血常规检查

轻度非再生性贫血常出现于FIP患猫,有时可能发生严重贫血,也可能出现小红细胞症和血细胞比容降低。淋巴细胞减少症是自然感染和实验诱导的FIP最常见的血液学异常,这是由病毒诱导的T细胞凋亡衰竭引起的,并且疾病发展最终结局可能与淋巴细胞减少的程度有关。

👉👉2 血清生化检查

血清球蛋白浓度增加是FIP患猫普遍能观察到的生化异常,这是非特异性反应的结果,特别是γ-球蛋白浓度的上升,对于FIP具有较高的阳性预测值。白蛋白浓度常常出现下降,主要是由于血管炎继发的外渗引起,同时,作为负急性期蛋白,其水平也会轻微下降。高球蛋白血症可引起总蛋白浓度上升,但由于白蛋白浓度的下降,部分FIP患猫的总蛋白浓度也可能保持正常。大部分研究表明血清白球比对于FIP的诊断价值更大,FIP患猫的白球比相对于正常猫显著降低。当白球比低于0.4时,高度怀疑FIP;而当其高于0.8时,基本可排除FIP。此外,FIP患猫可能会出现单纯的高胆红素血症,其与肝酶升高无关,这是由于机体红细胞被过度破坏,而猫自身的葡萄糖醛酸化能力较差,从而导致胆红素和胆绿素等血红蛋白的分解产物逐渐累积。APP,急性期蛋白(acute phase protein),感染、烧伤、手术、创伤可迅速诱发机体产生以防御为主的非特异性反应,如体温升高、血糖升高、分解代谢增强、负氮平衡及血浆中某些蛋白质浓度迅速升高。这种反应称为急性期反应,所表达的蛋白质称为急性期蛋白。急性期蛋白是肝细胞应对急性期反应的产物,急性期反应就是机体对各种损伤(感染、创伤、坏死、恶性生长等)的早期非特异性但高度复杂的反应。FIP会引起炎性反应,因此急性期蛋白的浓度将会增加。在猫主要检测的项目是猫血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A, SAA)、α1-酸性糖蛋白(α1-acid glycoprotein, AGP)和结合珠蛋白(haptoglobin, Hp),其中AGP最准但不能作为唯一判定FIP唯一依据。

3 逆转录聚合酶链反应RT-PCR

利用逆转录聚合酶链反应,

由于FCoV生物型特定的遗传因素未知,且基因组中含有多个单核苷酸多态性,因此RT-PCR只能检测出FCoV毒株,无法区分FECV和FIPV。当病毒数量较低或在样品运输过程中RNA发生降解时,可能会出现假阴性的结果。因此,RT-PCR检测方法有很大的局限性,阳性并不代表一定患有FIP,阴性也无法排除FIP。研究表明,检测渗出液、眼房水和病变组织中的FCoV(例如北京双井纳吉亚可以做腹部淋巴结穿刺,取淋巴结细胞做PCR),对于FIP有较大的诊断价值,而血液、粪便和脑脊液等的检测无太大意义。👈👈👈

4 FCoV抗体水平检测

FCoV抗体水平可通过免疫荧光抗体检测、酶联免疫吸附测定和病毒中和实验等方法进行检测,不同的实验室采用不同的检测方法导致结果有较大差异。与RT-PCR一样,FCoV抗体水平检测只针对FCoV,而不能确定是FIPV。Meli等的研究显示,在富含病毒的样品中,FCoV抗体水平检测也可能出现假阴性,这可能由于样品中病毒粒子与抗体相结合而导致其检测水平极低, 甚至无法检测到。此外,由于感染FCoV后经过18~21 d才会产生抗体,若在接触病毒后过早检测,也会导致假阴性结果。当对猫群进行FCoV检疫或净化时,测定抗体水平十分有用。若检测方法足够敏感,临床表现健康的猫FCoV抗体阴性结果则代表该猫未受感染。

5 渗出液分析

FIP患猫的渗出液呈不同程度的黄色,澄清或轻度混浊,并且黏稠,可能含有纤维蛋白凝块。渗出液蛋白含量高(大于3.5 g·dL-1),含有少量有核细胞(每微升少于5 000个细胞),通常是轻度退化的中性粒细胞和巨噬细胞。如果抽取的液体带血,或有脓,或呈乳糜状,或发出恶臭,发生FIP的可能性就很小。渗出液中蛋白浓度的测定也有一定的诊断价值。当白球比大于0.8时,几乎可排除FIP;当白球比在0.45~0.8之间时,可能是FIP;当白球比小于0.45时,极有可能是FIP。

通过全自动血液分析仪(Sysmex XT-2000iV, Sysmex Europe, Norderstedt, Denmark)进行总有核细胞计数(ΔTNC),具有较高的FIP诊断准确性。FIP患猫的ΔTNC值比健康猫高很多。当参考临界值定为1.7时,其诊断敏感性为79%~90%,特异性为94%~100%,当参考临界值定为2.5或3.4时,其特异性增至100%。

Rivalta(李凡他)试验是一种简单的可区别渗出液和漏出液的检测方法。在透明试管或量筒(体积为10 mL)中加入8 mL蒸馏水,再加入一滴98%乙酸后摇匀混合,然后滴入一滴体腔积液,若液滴在溶液中迅速消散,并且溶液仍然澄清,则结果为阴性;若液滴保持其形状,或停留在液面,或呈水母状缓慢下降,则结果为阳性。FIP渗出液不仅蛋白含量高,并且纤维蛋白原和炎症介质的浓度也高,因此会呈阳性结果。一项研究表明其对FIP的敏感性为91.3%,特异性为65.5%,阳性预测值为58.4%,阴性预测值为93.4%。当排除淋巴瘤和细菌感染等疾病,或只考虑2岁以内的猫时,这些值将增加。鉴于其良好的敏感性和阴性预测值,Rivalta试验应被纳入每只有渗出液的FIP患猫的常规检查中。

通过免疫荧光染色方法检测到渗出液中巨噬细胞被FCoV感染(注意使用阴性和阳性对照),可确诊为FIP。虽然FCoV可能存在于健康猫,但只有FIP患猫的巨噬细胞中才含有足量的抗原导致阳性染色。然而,当感染的细胞数量不足,或病毒含量过低,或由于抗体结合导致抗原无法被检测到时,均可能出现假阴性结果。

6 影像学检查

湿性FIP中,在发病初期,渗出液的体积可能很小而不易被察觉。此时,超声或放射学X光可用于鉴别或确认是否有渗出液。FIP患猫的腹部超声表现可能有:无回声或轻度回声性的腹腔积液;肠系膜处有高回声团块;腹部淋巴结肿大,呈低回声;肝和脾肿大,呈弥漫性或局灶性低回声;肾出现髓缘征,皮质回声增强,低回声结节和包膜下积液;肠壁增厚或肠道肿块病变等。而通过横膈膜进行胸部超声可见胸腔积液,或由于肺部浸润引起的彗星尾伪影。

猫传染性腹膜炎的胸部X线摄片可能显示:胸腔积液;心包积液的猫,心脏轮廓增大;化脓性肉芽肿性肺炎的猫,肺结节或支气管周围浸润。腹部X线摄片可显示由于腹腔积液、肝肿大、脾肿大、肾肿大以及胃肠道或腹腔淋巴结肿块性病变而导致的腹膜或腹膜后细节丢失。

7 组织病理学检查

👉👉👉👉(仅限于尸 检,活体不能开腹,增加救治难度!)

在尸体剖检中,FIP患猫的大体病理表现可能包括:不同程度的腹腔、胸腔或心包积液;纤维蛋白渗出粘连;肠系膜结块;弥漫性或局灶性肠壁增厚或肠道肿块病变;腹部器官增大或不规则,胸部和/或腹部淋巴结肿大;肾、肝、脾、胰腺和肺等器官实质内或浆膜表面出现大小不一的多灶性、粟粒样的结节性病变(肉芽肿),呈白色、乳白色、黄色或褐色;鼻腔和鼻窦内也可能出现损伤;检查脑部可能发现脑膜有纤维状渗出物,伴或不伴有脑室扩张和脑积水。干性FIP病例的损伤可能会更严重。FIP的组织病理学表现主要是全身性血管炎和脓性肉芽肿性病变。病变主要包括巨噬细胞和中性粒细胞增多,淋巴细胞和浆细胞较少。病变内可能出现坏疽。此外,脓性肉芽肿性脑膜脑脊髓炎、脉络膜炎、膜性肾小球肾炎以及淋巴细胞衰竭等病理变化也有报道。

免疫组织化学染色法是确诊FIP的金标准,用于显示受损组织中是否存在病毒,但此方法只能在专业的实验室进行。由于猫的组织具有黏性,常常会与不相关的抗体非特异性结合,因此必须使用非FCoV抗体作为对照,若缺少对照则会导致假阳性结果。然而,从患猫身上安全有效地采集病变组织样本是非常困难的,并且这种侵入性的诊断方法很难被主人接受,因此FIP的确诊对于临床兽医来说仍然是个难题。

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