陈瑞芳，王士长，李兴芳，姜伟伟，陈小亮，黄怡

(广西大学动物科学技术学院，南宁530005)

水牛初乳中免疫因子和生长因子质量浓度的研究

陈瑞芳，王士长，李兴芳，姜伟伟，陈小亮，黄怡

(广西大学动物科学技术学院，南宁530005)

研究水牛初乳中免疫球蛋白IgG，IgA和类胰岛素样生长因子（IGF-I）质量浓度的变化特点。用ELISA方法检测水牛分娩后7 d内初乳样品的IgG，IgA和IGF-I质量浓度，同时检测3种成分在水牛常乳中的质量浓度。结果表明：分娩后3 h的水牛初乳IgG，IgA和IGF-I质量浓度最高，分别为78.22 g/L，8.83 g/L和1 099.78 μg/L，常乳中的质量浓度分别为1.87 g/L，0.71 g/L和358.30 μg/L。IgG在泌乳的第1天内下降91.18%，IGF-I下降57.02%，IgA在头2 d内下降85.84%，之后缓慢下降接近常乳。因此，水牛泌乳最初的1～2 d内初乳含有丰富的IgG，IgA和IGF-I，具有很高的开发利用价值。

水牛初乳；IgG；IgA；IGF-I；ELISA法

牛初乳含有丰富的免疫因子和生长因子，其中IgG，IgA和IGF-I是最受关注的三种活性成分，被证实对人和动物有免疫调节、促进生长发育以及降低糖尿病患者血糖等功能，因而成为开发功能性食品和提取相关活性物质的原料[1-3]。国内外对荷斯坦牛初乳的研究报道较多，但到目前为止，在水牛初乳方面研究较少，未见有关于生物活性物质含量特点的研究报道。水牛乳品质远远优于荷斯坦牛乳，市场前景广阔[4]，因此，水牛乳产品开发成为近年来乳制品研究的热点之一。本研究以目前存栏数最多的摩×本杂交水牛为研究对象，系统地分析水牛分娩后7d内初乳的IgG，IgA和IGF-I质量浓度的变化规律以及在常乳中的质量浓度，对正确认识水牛初乳的生物学特性和利用价值、合理开发水牛初乳资源有重要的意义。

泌乳水牛：摩×本三代杂交水牛，产犊第2～5胎次，分娩后7日内和处于泌乳中期各10头。

采样地点：广西南宁雄牛牧业有限责任公司那马奶水牛生产基地。

动物管理：泌乳水牛每日定量采食两次，日粮由粗料和精料混合组成，粗料主要是新鲜象草和青贮全株玉米，少量的玉米芯和豆腐渣。舍饲饲养，牛舍为开放式，有运动场，泌乳水牛每天可以在水塘里浸泡7 h左右。手工挤奶，每天两次。

主要仪器和试剂：瑞士Sunrise酶标仪；IgG和IgA测试盒：美国UCL公司；IGF-I测试盒：美国RB公司。

1.2.1 样品采集和处理

分别于水牛分娩后3h，12h及1，2，3，4，5，6，7 d采集乳样品各100 mL/头，另外采集常乳样品100 mL/头，立即于-20℃保存。测定前，样品于4℃解冻，将同一时间段的样品等量混合均匀，并于4℃，6 000 r/min离心20 min，去除脂肪，取上清分析各项指标。

1.2.2 指标测定

IgG和IgA质量浓度采用竞争抑制酶标免疫分析法，IGF-I含量采用双抗体夹心ELISA法。初乳上清分别用相应的试剂盒处理，在酶标仪450 nm波长处读数，用Curve Expert 1.3软件绘制标准曲线，并计算结果。IgG，IgA和IGF-I的标准曲线如图1所示。生物看出，水牛初乳的密度随泌乳时间增加而呈下降趋势实异的。

1.2.3 数据处理

试验数据用Microsoft Office Excel 2003软件处理并绘制曲线图。

水牛初乳的IgG，IgA和IGF-I质量浓度变化及在常乳中的质量浓度如图2～图4所示。

由图2可以看出，IgG在3h水牛初乳中的质量浓度最高，为78.22 g/L，是常乳的41.83倍。IgG在泌乳的第1天内下降91.18%，之后下降幅度显著减小，并逐渐接近常乳。常乳中IgG的质量浓度很低，为1.87 g/L。

由图3可以看出，3 h水牛初乳中的IgA质量浓度最高，为8.83 g/L，是常乳的12.44倍。IgA在头2 d内下降85.84%，之后缓慢下降接近常乳。IgA在常乳中的质量浓度为0.71 g/L。

图4表明，3h水牛初乳中的IGF-I质量浓度最高，达到1 099.78 μg/L，是常乳的3.07倍。 第1天内IGF-I的下降幅度为57.02%，之后持续缓慢下降至接近常乳。IGF-I在常乳中保持较高水平，为358.30 μg/L。

动物的品种、泌乳阶段、年龄以及健康状态等因素影响免疫球蛋白和IGF在乳中的质量浓度[5]。与其他品种奶牛的初乳相比，在相同的泌乳时间里，除了24h外，水牛初乳其他时段的IgG质量浓度均高于中国荷斯坦奶牛[6]和新疆褐牛[7]，但在72 h内比瑞典黑白花牛低[8]；而IgA质量浓度则比瑞典黑白花[8]牛高5～10倍，和胡松华[9]报道的结果接近，但3～6d内的水平不如曾林等[10]报道的结果；尽管初乳的IGF-I质量浓度在不同的研究报道中差距很大[8，11-12]，但是水牛初乳的IGF-I水平都远远高于这些研究结果。本次研究还发现，水牛常乳的IgG，IgA以及IGF-I质量浓度均高于国内外黑白花牛等品种奶牛常乳中的水平。乳中的生物活性成分主要来自母体血液，部分IGF-I还可以由乳腺组织合成。血清中的IGF-I质量浓度与能量平衡、黄体的活性以及胰岛素水平有关，这些指标的变化水平因品种而异[11]。水牛体内合成和转移这些生物活性物质的能力与其养分代谢、激素水平、乳腺功能和繁殖性能等的关系，以及这些生物活性物质合成在营养和分子水平上的调控途径，是进一步的研究方向。这些方向的突破，对生物活性物质的生物反应器研究有重大意义。

水牛在泌乳最初的1～2d内的初乳含有丰富的IgG，IgA和IGF-I，具有很高的开发利用价值。

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Studies on contents of immune factors and growth factor in water buffaloes colostrums

CHEN Rui-fang，WANG Shi-chang，LI Xing-fang，JIANG Wei-wei，CHEN Xiao-liang，HUANG Yi(College of Animal Science and Technology，Guangxi University,Nanning 530005,China)

Changes in immunoglobulin IgG，IgA and insulin-like growth factor-I(IGF-I)concentration in water buffaloes colostrums were studied.Colostrums within 7days postpartum and mature milk were detected IgG,IgA and IGF-I level by using ELISA kits.The results shown that the highest contents appeared in 3h postpartum by 78.22 g/L,8.83 mg/mL and 1 099.78 μg/L,respectively.They were 1.87 g/L,0.71 g/L and 358.30 μg/L in mature milk,respectively.IgG and IGF-I descended by 91.18%and 57.02%within the initial 1st day,respectively.IgA decreased by 85.84%within the first 2 days.After this,the concentrations got close to that of the mature milk by slow descending extents.Conclusion:Water buffaloes colostrums is rich in IgG,IgA and IGF-I within 1～2 days postpartum and is worth of exploitation.

water buffalo colostrums;IgG;IgA;IGF-I;ELISA

TS252.59

A

1001-2230（2010）03-0019-03

2009-10-21

广西科学研究与技术开发计划项目（桂科转0718005-5B）。

陈瑞芳（1983-），女，硕士研究生，从事水牛初乳的开发利用研究。

黄怡

中国乳品工业2010年3期