薄层色谱法（英语：Thin layer chromatography，简称TLC，又称为薄层层析）是一种用于分离混合物的色谱法技术。[1] 在分析化学特别是针对有机化合物的分析中，薄层色谱法是极为重要的分离方法。

薄层色谱法在覆盖有很薄一层吸附剂的玻璃板、塑料片或铝箔上进行。吸附剂又称为薄层色谱固定相：常为硅胶、氧化铝或纤维素。操作时先将待分离样品用毛细管点于板上，然后在密闭的色谱法缸中，用单一或混合溶剂作为流动相，由流动相的毛细作用缓慢地将混合物样品中的不同组分由下而上爬升至板的顶端。因为样品中各组分与固定相的作用力不同，在流动相中溶解度也不同，导致各组分的上升速度有差异而最终在板上形成上下不一的斑点，从而达到分离混合物的目的。[2]

薄层色谱法在监测反应进程，鉴定特定化合物以及测定物质的纯度等均有广泛的应用，如：分析神经酰胺与脂肪酸；检测在食物和水中的农药或杀虫剂；在法医的工作中，分析纤维的染料成分；化验放射性药物的放化纯度；鉴定药用植物及分析其内部成分。[3]

高效薄层色谱是对经典薄层色谱的改进法之一，该法中色谱的灵敏度和分离度都有很大的提高，可以准确地检出极微量的物质。