快慢羽鉴别法

将快慢羽基因运用于品种培育中，一般采用杂交配套的方法：用快羽公鸡和慢羽母鸡杂交，子一代中雄性雏鸡全为慢羽，雌性雏鸡全为快羽，通过观察出壳雏鸡的羽毛来判断雌雄。技术员通过观察出壳雏鸡的主翼羽、覆主翼羽、副翼羽和覆副翼羽的相对长度，就能在雏鸡刚出壳时靠肉眼观察雏鸡羽毛来鉴定雏鸡性别。将快慢羽伴性遗传应用于实际生产，可以大大减少鉴别应激和降低技术难度。虽然伴性基因应用于生产较大程度地方便了养鸡场的雌雄鉴定，但是伴性基因有可能在染色体上与某些内源性病毒基因连锁，可能会影响鸡的生理健康。

羽色鉴别法

纯系繁育中的雌雄自别方法是：金色羽公鸡和银色羽母鸡杂交，使F1中所有公雏的羽毛是银色，所有母雏的羽毛是金色，从而技术员在雏鸡出壳后便能根据羽毛颜色靠肉眼来区别雌雄。同理，养殖场利用横斑芦花羽色也能自别雌雄，其区分雌雄的方法是根据头部、腹部和脚趾部3个部分的颜色特征来鉴定雌雄，如芦花鸡的雌雄自别。此方法局限于培育几个配套系，不能广泛用于养禽业。

照蛋鉴别法

当鸡胚孵化到第三天，技术员通过照蛋可见明显的胎盘卵黄囊血管；第四天照蛋，胚胎和卵黄囊血管呈“蜘蛛状”，因为胚蛋中血液循环逐渐增强，所以可在第3～3.5天时照蛋观察胚胎血管，根据照蛋得出的结果可以对胚蛋进行雌雄鉴别。该方法的依据是：区别公母主要根据血管（卵黄囊侧血管）分枝情况和对称与否（以胚胎前、后卵黄囊血管的连线为“中轴”来衡量）。一般公雏比较对称、粗大；母雏不对称、较纤细。此方法鉴定节省了孵化时间、节约了孵化成本和操作简单方便，但存在较大的误差，出错率高，因此不适合用于生产。

分子水平鉴定方法

在孵化期内胚胎会进行一系列的发育分化，技术员可以对胚蛋进行照蛋鉴定性别，或对胚蛋取样进行分子水平检测性别。胚胎鉴定大大缩短了检测时间，节约了成本。分子水平检测性别技术比较成熟，而且是实验室检测鸡胚或雏鸡性别的首选技术方法。分子水平鉴定鸡胚或雏鸡性别的方法主要有3种：流式细胞仪法、Embrex方法和PCR方法，其中PCR方法是实验室中鉴定家禽性别较常用的方法。

流式细胞仪法

流式细胞仪法

公鸡的性染色体组成是ZZ，母鸡是ZW，染色体W比染色体Z中的DNA含量少得多。其具体方法是：使用流式细胞仪高度精确检测细胞中DNA含量，对比待测细胞与对照细胞的DNA含量，燕海峰等指出以每个分子DNA含量为基础，再用流体细胞计进行检测，能检测出雌雄细胞DNA含量的差别，从而确定家禽性别。姜桂苗等指出虽流式细胞仪可高精度测量细胞中DNA含量，但该方法仪器成本昂贵，且检测时间略长，不适用于大批量生产。

Embrex方法

Embrex方法

雌性激素存在于雌鸡尿囊液中而不存在于雄鸡尿囊液中，因此雄鸡尿囊液中检测不到雌性激素。所以根据尿囊液中雌激素的含量情况，对13～18胚龄的鸡胚进行性别鉴定，该方法不受种鸡的日龄、品种等因素影响。该方法的不足之处是：取样时需要穿过蛋壳扎孔，细菌等微生物容易透过蛋壳入侵胚胎。所以技术员应用该方法鉴定胚蛋性别时，必须在取样前对禽蛋进行消毒，在孵化后期对禽蛋进行免疫，否则会导致出雏率下降，弱雏率升高等问题。

PCR方法

PCR方法

禽类细胞中拥有高度保守性的CHD基因，可作为一个广泛的遗传标记应用于鸡的性别鉴定。CHD基因连锁在鸡的性染色体上，在W染色体上有CHD-W基因，CHD-W基因的同源基因连锁在Z染色体上，称CHD-Z基因，因此可以利用雌鸡细胞中CHD-W基因的独特性，运用PCR技术，进行鸡的性别判断。PCR方法基本步骤为：根据CHD-W基因序列构建一对特异性引物，将这对引物、待测鸡细胞和各种试剂混合，进行PCR反应，扩增CHD-W基因序列。再用琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物，若结果出现marker拥有的CHD-W基因条带，则为雌鸡；若不出现CHD-W基因条带，则为雄鸡。

该方法灵敏度高，准确率可达100％，所需样品少，在实验室的基础研究中较常用。在实际生产中，因为绝大部分养鸡场无法支付起如此昂贵的PCR仪，而引物的设计又十分复杂，会影响到准确性和灵敏度，同时PCR扩增所需试剂价格高，所以综合各种因素得出，该方法不适用于实际生产。

关于小鸡早期性别鉴定的总结

目前我国大部分养鸡场主要通过翻肛的方法鉴别1日龄雏鸡性别，翻肛法应用范围较广泛，具有经济、方便、快速和准确的优点，但对工人劳动强度要求高且对家禽的应激过大；羽速羽色鉴别法的应用没有像翻肛一样广泛，但该方法作为纯系繁育中性别鉴别的主要手段，虽然操作简单，但由于内源性病毒基因的存在、连锁基因具有未知风险、伴性基因表达效果不一致及成年鸡在生产性能上表现不一等问题，需要对该方法的原理进行更加深入的探究；照蛋法存在鉴定不准确、准确率低和鉴定速度慢等问题，在养鸡行业中遭到淘汰；分子水平鉴定法是近年来创新的性别鉴定法，消除了因引入伴性基因导致的家禽养殖生产问题，减少对出壳雏鸡的伤害，提高鸡的出栏率，鉴定的准确率高达100％，大大降低工人的劳动强度，规范了管理，但该方法需要高端精密的仪器以及严格的技术要求，而我国大部分的养鸡场属于中小型养鸡场，无法承担高昂的仪器和试剂成本，同时工人的理论与操作达不到该技术的要求，因此分子水平鉴定技术仅局限应用于实验室的科技研究，或者专门化的大公司用此法进行大规模家禽雌雄鉴别。

总而言之，随着畜牧业朝着机械化、自动化、信息化发展，养鸡行业使用传统方法鉴定鸡的性别已无法适应时代的发展，所以需要优化雏鸡鉴定技术，比如将两种或几种的传统方法相结合，应用于实际生产上，更重要的是需要从根本上对传统方法进行改革创新。现代养鸡行业若要把分子水平鉴定方法广泛应用于养鸡场生产，就需要较大限度地降低技术成本、简化操作工艺及结合实际生产的工艺步骤设计分子检测工艺流程，同时加大对科研的投入，研究更经济、更符合生产实际的检测技术，把养鸡行业和高新科技相结合，打造真正的畜牧业现代化。

本文摘自《养禽与禽病防治》2019年第12期

作者： 孔少芬、郑茗、聂庆华

单位： 华南农业大学动物科学学院

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