正置显微镜载物台下方（或者倒置显微镜载物台上方但位于光源/视场光阑的正前方）是载物台下聚光镜（图1）。尽管这里也有类似于显微镜微调/粗调对焦功能的对焦轮，但该组件主要用于对焦来自光源/视场光阑的光而不是对焦标本。

‘载物台下的聚光镜’负责收集来自光源的大部分光并将其作为锥形成像光聚焦在显微镜载物台的载玻片上。正确调整聚光镜后，照亮标本并进入物镜的光线将得到充分优化。这将使最终图像呈现均匀的强度和对比度。由于显微镜中的物镜各有不同，因此意味着载物台下聚光镜需要在更改放大倍数时予以调整。

载物台下聚光透镜内有2个组件需要调节后才能设置正确的柯勒照明。这2个组件分别为居中螺丝和光阑。除了视场光阑之外，载物台下聚光镜也有光线控制的光阑，可通过聚光镜划片或滚环来进行调节，这与视场光阑较为类似。该光阑可控制标本照明用的光锥角度。在数值孔径(NA),的相关文章中也提到过，整个显微镜系统的NA并不仅仅通过物镜来决定。确实，当载物台下聚光镜光阑打开时就会让整套仪器的NA增加并获得更高的分辨率、对比度和优化照明。居中螺丝确保了用于照明玻片的光线会正对视野中心，从而在整个标本上形成均匀的照明强度。