放散试验操作规程

1.

目的

常用于

ABO

亚型的鉴定、

全凝集或多凝集红细胞的定型、

类

B

的鉴定以及新生

儿溶血病的诊断等。

2.

适用范围

ABO

亚型的鉴定及新生儿溶血病的诊断。

3. 

职责

3.1

检测者职责：负责血液标本的处理、交叉配血试验操作及相关记录；

3.2

复核者职责：负责对血液标本的检测过程以及关键控制点进行审核，校对试验结

果和检测报告。

4. 

原理

红细胞上的抗原与血清中的抗体在适合条件下发生凝集或致敏。这种结合是可

逆的，如果改变某些物理条件，抗体又可从结合的红细胞上放散出，再以相应的红

细胞鉴定放散液内抗体的种类并测定其强度，用以判定原来红细胞上抗原的型别。

这种方法常用于

ABO

亚型的鉴定、

全凝集或多凝集红细胞的定型、

类

B

的鉴定以及新

生儿溶血病的诊断等。

放散试验的方法很多

,ABO

血型，

IgM

抗体以热放散法为常用。

Rh

血型，

IgG

抗

体以乙醚放散法为常用。

5. 

设备、材料和试剂

5.1 

设备

细胞洗涤离心机

编号

/

型号：

132/KA-2200

、

台式离心机

编号

/

型号：

287-1/TD4

、

显微镜

编号

/

型号：

77/IM

、数显恒温水浴锅

编号

/

型号：

264/HH-2

、循环恒温水浴

箱

编号

/

型号：

283/HH-6

。

5.2 

材料

5.2.1 

送检标本要求静脉采集至少为抗凝血

5ml

；

5.2.2 

标本处理：标本的验收、标识、存放、贮存、销毁等处理按《标本采集、接收

及处理操作规程》进行。

5.3 

试剂

相应的血清抗体、

A

型和

B

型试剂红细胞（

3-5%

）盐水悬液、乙醚

(

分析试剂

) 

6. 

检测环境

试剂与标本贮存环境：

4

℃冰箱

检测环境：室温、

37

℃、

56

℃

7. 

步骤与方法

7.1

加热放散法

7.1.1 

将受检红细胞以大量生理盐水洗涤

3

次，末次洗涤后，将盐水除尽，取压积红

细胞一份，分别与

2

份抗

A

和抗

B

型分型血清混合，置

4

℃冰箱

1

小时，每隔

10

分

钟将试管振摇

1

次，使充分混合；

7.1.2 

离心去除上清液，以

4

℃冷盐水洗涤红细胞

3-4

次，倾去洗涤液，留取压积红细

胞。

加

1/2

容积的生理盐水

(

如放散液不立刻进行检查，

应以

AB

型血清代替生理盐水

)

。

置

56

℃水浴中

10

分钟，每隔

1

分钟振摇

1

次，使吸附在红细胞上的抗体充分放散出；