(A) siRNAs是短的RNA双链，在3’端有两个碱基的游离;（B）shRNA由正义链和反义链通过环状序列隔开共同组成;（C）shRNA构建用于插入表达载体;

siRNA与shRNA两者的共同点是都可以有效沉默或抑制目标基因的表达，但是相比化学合成的siRNA，基于载体的shRNA具有稳定性高、脱靶率低、作用时间长和易导入难转染细胞等优势，是研究者广泛使用的技术。

siRNA和shRNA的异同点

shRNAsiRNA

稳定性 高 低、容易降解，寿命短

作用时效 作用时间较长，持续数星期甚至更长 作用时间较短，一般为1周左右

脱靶率 低 高

导入细胞方式 质粒载体；病毒导入，转染效率高 普通转染，对于难转染细胞转染效率低

表达方式 可由聚合酶II型和III型启动子驱动； 可使用诱导表达系统；可与报告基因共表达，可视化细胞导入效率直接化学合成

抑制效果检测时间 取决于靶蛋白的半衰期

维真生物现有涵盖27000余种人源基因的shRNAs序列，可随时克隆至腺病毒、慢病毒、腺相关病毒载体。不仅如此，我们还拥有专业分析和shRNA设计技术，可为您提供shRNA 定制服务。此外，还可为您提供质粒转染试剂、shRNA病毒包装服务、shRNA载体导入细胞和干扰效果验证服务，助力您的干扰实验顺利进行！

单shRNA质粒构建

套餐shRNA质粒构建(3保1)

套餐shRNA质粒构建(4保1)

2 in 1 shRNA质粒构建

3 in 1 shRNA质粒构建

4 in 1 shRNA质粒构建

诱导性shRNA质粒构建

(Dox、Cre……)

mir30-based shRNA质粒构建

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根据客户提供的高效siRNA靶点和靶基因信息构建多和1 shRNA质粒，将多条shRNA克隆至一个载体中，不仅可用于转染细胞，也可包装成病毒导入宿主。

优劣势：

1) 将多个作用于同一基因不同mRNA部位的shRNA序列克隆进同一shRNA载体，大大增加目的基因下调表达的概率；

2) 将高效的、作用于多个靶基因的shRNA序列克隆进同一shRNA载体，实现多基因同时下调表达的目的；

3) 无需序列筛选，大大减少工作量；

4) 多种病毒载体相可供选择，实现不同实验目的。

不足之处：无法确定哪一条shRNA的干扰效果更好；

与传统shRNA只能在Pol III类型启动子（U6或者H1启动子）下表达不同，miR30-shRNA也可使用Pol II类型启动子驱动表达，包括广谱启动子（如CMV、CAG和EF1a等）、Tet-On诱导调控启动子TRE和组织特异性启动子（如hSyn、TBG和cTnT等），可以启动较大的基因转录，且需要polyA等转录终止信号。维真生物可以根据客户指定的启动子和提供的shRNA序列将其构建至mir30-based shRNA质粒，实现组织特异性基因沉默。

包括Cre/loxp，Flp/Frt和Tet on等诱导系统。

以Cre on shRNA为例，该服务是使用FLEX(flip-excision)系统实现shRNA诱导表达。

FLEX是一种非常强大的控制基因表达的方法，它采用2对异质、反向的loxp位点(loxP和lox2272)，经过DNA翻转产生带有不同loxp位点的DNA翻转，防止DNA的进一步翻转，从而实现目标基因不可逆的翻转。维真生物采用改良版FLEX，将2对异质、反向的loxp位点置于启动子两边，通过Cre作用决定启动子方向，通过不同荧光蛋白可视化shRNA的表达。

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