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实验八 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化实验目的1.了解转化的概念及其在分子生物学研究中的意义。2.学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞的方法。3.学习将外源质粒 DNA 转入受体菌细胞并筛选转化体的方法。 实验原理 转化( Transformation )是将异源 DNA 分子引入另一细胞品系，使受体细胞获得新的遗传性状的一种手段，它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究的基本实验技术。 转化中的受体细胞 转化过程所用的受体细胞一般是限制性修饰系统缺陷的变异株，即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变株，常用 RM 符号表示。 转化方法：电击法、 CaCl2、 RuCl等化学试剂法 感受态细胞：的处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许外源 DNA 分子通过时细胞的状态。 转化细胞(转化子)：带 异源 DNA 分子的受体细胞( Transformant )。 实验原理实验原理 本实验 菌株为受体细胞，用 处理受体菌使其处 为感受态， 后 质粒 ，实 转化。 质粒 带 的基因，因使受了质粒的受体菌 的性，用 符号表示。将currency1过转化后的“受体细胞currency1过fi，在含 的fl 基， 转化体 能，受转化的受体细胞因” 的能 。Amp 细菌含Amp基转化的因 细胞生状态和。 转化的质粒 DNA 的质和。 试剂的质。 菌和其它外源 DNA 的 。 实验仪器 超净工作台。